复方丹参注射液对重症急性胰腺炎大鼠的作用机制
2012-04-25陈卫红袁卫东程风华刘大基
陈卫红,王 欣,李 瀚,袁卫东,程风华,刘大基
(1.黄石中医医院,湖北 黄石 435000;2.武汉同济医学院同济医院 胆胰外科,湖北 武汉 430030)
近年来我国重症急性胰腺炎(Severest Acute Pancreatitis,SAP)发病率呈上升趋势,临床起病急、病死率高达20%~30%[1-3]。对其发病机制至今未完全阐明,临床亦缺乏有效的特异性药物。而借助SAP动物模型是研究的重要手段[4]。本文通过对30只大鼠诱导SAP模型进行复方丹参治疗对照研究,通过检测C反应蛋白(CRP)、血清淀粉酶(Amy)、乳酸脱氢酶(LDH)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)等免疫因子变化,探讨复方丹参注射液对SAP治疗的作用机制。
1 材料与方法
1.1 动物 二级清洁健康大鼠40只,体质量220~250 g,均由湖北医学动物中心提供。
1.2 试剂 Amy、CRP和LDH试剂盒均购于上海科华生物试剂公司;IL-1和IL-6检测试剂盒购于美国R-D公司;苏木素、伊红(HE)染色试剂盒购于珠海贝索生物技术有限公司。
1.3 模型制备 大鼠适应性喂养1周,于术前12 h禁食不禁水。30只大鼠间隔1 h,连续7次腹腔内注射雨蛙素50 mg/kg,并在首次注射雨蛙素5 h后腹腔注射10 mg/kg脂多糖。蛋白酶体抑制剂Ps-341阳性对照组:注射脂多糖前0.5 h腹腔注射50% DMSO 0.2 mL(生理盐水稀释)。复方丹参注射液治疗组:复方丹参注射液20 mL加0.9%氯化钠150 mL静脉滴注每日1次,共7 d。对照组:用生理盐水代替雨蛙素和脂多糖,依上述同样方法腹腔注射。
1.4 检测指标 观察各组大鼠一般情况及病死率。
1.5 血清淀粉酶及血浆内毒素测定 各组大鼠于术后24 h乙醚吸入麻醉后开胸,迅速心脏穿刺取血液5 mL,4 ℃静置1 h,3 000 r/min离心10 min,取500 μL上清,日本东芝120全自动生化分析仪检测Amy、LDH、CRP。
1.6 血清细胞因子检测 同上处理,取500 μL上清,-20 ℃保存,ELISA法检测IL1-β、IL-6。……
