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HPLC-MS法对通顶散中人参藜芦相反相用物质基础研究

2012-04-25孙佳明张艳平贾雪婷

长春中医药大学学报 2012年5期

孙佳明,李 娜,张艳平,宫 爽,贾雪婷,张 辉

(长春中医药大学中医药与生物工程研发中心,吉林 长春 130021)

通顶散源于明代名医吴鹤皋所著《医方考》,方由藜芦、人参、川芎、细辛、石膏、甘草组成,主治“中风不省人事,病已极矣,非平药可以开其壅塞”,以藜芦与人参、细辛共用,取其相反而相用也。藜芦总生物碱具有明显而持久的降压作用,临床上多用于治疗脑卒中不语[1]。有报道[2]称人参与有毒藜芦配伍,有毒性降低的结果,因此有必要结合毒理学方法应用现代高效液相色谱-质谱联用技术,对“通顶散”中“人参-藜芦”相反相用的物质基础进行研究。

1 材料和方法

1.1 试验药物 藜芦、人参、川芎、细辛、石膏和甘草购自吉林省长春市吉林大药房;试验所用的通顶散和去人参样品水煎液由长春中医药大学研发中心提供。

1.2 仪器 Agilent 1100 series LC-MSD液质联用仪(美国安捷伦公司),包括:Agilent SL型多级离子阱质谱仪、低压四元梯度泵、二极管阵列检测器(DAD)、自动进样、柱温箱、Chemistation化学工作站等;GL-20G-H型低温超速离心机;BP211D型十万分之一电子天平(北京赛多利斯天平有限公司)。

1.3 试剂 乙腈、甲醇和甲酸为色谱纯(Fisher公司生产);水为超纯水(Milli-Q)。

1.4 实验方法

1.4.1 通顶散及其去人参样品水煎液的制备 各自将藜芦1 g,人参1 g,川芎1 g,细辛1 g,石膏5 g,甘草1 g(均为粗粉)混合,首次加10倍量水浸泡20 min,微沸提取40 min,第2煎加入8倍量水,微沸提取20 min,合并2次滤液,浓缩,得到通顶散水煎液;将藜芦1 g,川芎1 g,细辛1 g,石膏5 g,甘草1 g(均为粗粉)混合,同法制得去人参样品水煎液,供急毒测试用。将以上制备的煎液静置,经10 000 r/min离心10 min,取上清液,0.22 μm微孔滤膜过滤,4 ℃保存,供液质分析用。……

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