洪嘉婧，洪 杰，朱重玄(韩国)，郭 航，张 梦

(长春中医药大学，吉林 长春 130117)

针灸治疗哮喘是祖国医学防治哮喘的常用方法之一，临床上常用的针灸处方有辨证取穴、对症取穴以及邵氏“三穴五针”法等[1]。本课题应用纳升级多维液相色谱技术，对照研究不同针灸穴组防治哮喘的治疗效应，分析针刺后不同针灸穴组产生的差异蛋白，以期阐明其效应物质基础及其疗效差异。

1 材料与仪器

1.1 试剂 乙腈(ACN)、甲酸(FA)、胰蛋白酶(Trypsin)、牛血清白蛋白(BSA)、苯甲基磺酰氟(PMSF)、醋酸铵(NH4AC)。

1.2 实验仪器 Agilent1100纳升级多维液相分析系统(Agilent，USA)。

2 方法

2.1 实验动物及分组 清洁级雄性Wistar大鼠，体质量(130±30) g(吉林大学白求恩医学院动物实验中心提供，实验动物合格证号：0001468)。将56只大鼠随机分为7组,每组8只：A.空白对照组；B.捆绑组；C.假手术组；D.哮喘模型组；E.三穴五针组(大椎、双风门和肺俞)；F.郄会配穴组(膻中、双孔最)；G.降气平喘组(膻中、双孔最和丰隆)。

2.2 模型复制方法 大鼠哮喘模型复制依据实验室方法：D、E、F、G 4组大鼠一次性腹腔注射含卵蛋白0.25 kg和氢氧化铝凝胶0.25 kg的生理盐水混悬液0.001 5 L以致敏；15 d后将以上4组大鼠麻醉后固定于手术台上，行气管插管术,并经颈外静脉注射含卵蛋白的生理盐水溶液以激发哮喘发作。捆绑组仅作抓取，捆绑；假手术组的腹腔注射和颈外静脉注射均用如上等量的生理盐水；空白对照组大鼠不做任何处理，正常饲养。

2.3 选穴和针刺 选穴参照大鼠常用针灸穴位定位标准[2]。针刺方法:选用15 mm/0.30 mm毫针，从造模的第1天起针刺，膻中平刺5 mm，孔最、丰隆斜刺5 mm，大椎斜刺5 mm，肺俞、风门斜刺5 mm，各穴均捻转10 s，每隔10 min行针1次，留针20 min，隔日治疗1次，7次为1个疗程。……