黄丽洋,丁建君,姜山,杨杰,陈炜,胡建恩

(大连海洋大学食品科学与工程学院,辽宁大连116023)

斑点叉尾鮰鱼肠蛋白酶的分离纯化及其酶学性质

黄丽洋,丁建君,姜山,杨杰,陈炜,胡建恩

(大连海洋大学食品科学与工程学院,辽宁大连116023)

以斑点叉尾鮰Ictalurus punctatus鱼肠道为原料提取蛋白酶,对分离条件进行了优化,并对部分酶学性质进行了研究。结果表明:鱼肠内的蛋白酶在硫酸铵饱和度为70%时,所得沉淀中酶活力最高。经过阴离子交换层析分离后,蛋白酶的纯化倍数达到了218倍。该蛋白酶的最适温度为55℃,最适pH为7.5,具有良好的低温稳定性和酸碱稳定性,米氏常数为5.4 g/L。K+和Ca2+离子对该蛋白酶活性有较弱的激活作用,Mg2+则能显著激活蛋白酶活性;Na+和Zn2+对蛋白酶的活性有较弱抑制作用,而Cu2+和EDTA能显著抑制蛋白酶活性。

斑点叉尾鮰;鱼肠;蛋白酶;分离纯化

斑点叉尾鮰Ictalurus punctatus原产于美国密西西比河,其肉质鲜美,现已成为中国淡水养殖种类之一[1]和大宗出口加工鱼类之一。而加工过程中产生的鱼肚是高档食材,却作为废弃物处理,造成了环境的污染。动物性蛋白酶由于受原料限制,一直产量低、价格高。为此,本研究中,作者以斑点叉尾鮰的肠道为原料提取蛋白酶,对分离条件进行了优化,并对部分酶学性质进行了研究,旨在将废弃的鱼加工副产物作为生物制剂的原料。

1 材料与方法

1.1 材料

新鲜的斑点叉尾鮰鱼肠由江苏盐城海天水产品有限公司提供,预处理前在-20℃下保存备用。主要试剂有酪蛋白、牛血清蛋白、L-酪氨酸等,均为分析纯。……