毛晓露 卢忠心 陈 莉

武汉市中心医院，1检验科；2血液科，武汉430014

目的：真性红细胞增多症（PV）患者的骨髓中同时存在良性造血祖细胞和恶性造血祖细胞。恶性红细胞克隆可以在体外无外源性促红细胞生成素（EPO）存在的情况下，形成红细胞集落形成单位（BFU-E）。本实验观察甲磺酸伊马替尼对PV患者自发性红细胞生成的抑制作用。方法：15例PV患者（PV组），其中14例采集外周血2ml，1例采集骨髓2ml，另选10例无血液病的健康人（对照组），采集外周血2ml，所有样本均以EDTA-K2抗凝。用密度梯度法分离对照组和PV组外周血和骨髓的单个核细胞（PBMCs），将PBMCs浓度调整为1×105个／ml，分别在有甲磺酸伊马替尼（10μM）的半固体培养基和无甲磺酸伊马替尼的半固体培养基中进行培养。经形态学分析和台盼蓝染色分析细胞生长状态和死亡细胞数量。结果：1例骨髓中PBMCs的体外实验表明，BFU-E生长被甲磺酸伊马替尼完全抑制。14例PV患者外周血中PBMCs均可在无EPO时形成红细胞克隆，其中6例BFU-E生长部分被抑制，另8例完全被抑制。加入甲磺酸伊马替尼（10μM）后，BFU-E平均数较无甲磺酸伊马替尼时显著减少（P＜0.05）。将PV细胞与甲磺酸伊马替尼（10μM）反应24h和48h，不能有效抑制自发性的BFU-E生长。将反应时间延长到96h，BFU-E平均数显著减少（P＜0.05），表明与甲磺酸伊马替尼接触导致自发性的BFU-E生长抑制与反应时间相关。结论：甲磺酸伊马替尼可以在体外阻断或者明显抑制PV患者自身BFU-E的形成，提示PV的发病机理可能与某种未知的激酶有关。