邱梅婷

近年来，有研究中发现，人类白细胞抗原G(human leucocyte antigen protein G，HLA-G)是一种非经典性的MHC-I类的分子，其具有7种蛋白异构体，其中包括有三种可溶性的HLAG5、G6、G7分子和四种模型:HLA-G1、G2、G3、G4。HLA-G在人体内的分布局限，一般在胎盘的绒毛膜外滋养细胞中为高表达，具有显著的免疫抑制功能，主要通过参与母胎的免疫耐受从而形成人白细胞抗原G，即HLA-G。本文通过观察分析HLA-G在结直肠癌患者中的表达意义，总结应用价值，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院2007年3月至2011年3月结直肠癌患者24例，男14例，女10例;年龄45～78岁，平均年龄(54.1±0.7)岁，按照结直肠癌国际的INM分期标准［1］，分为Ⅰ级2例，Ⅱ级3例，Ⅲ级8例，Ⅳ级7例，对其组织标本的免疫组化检测结果进行回顾性分析。

1.2 仪器与试剂 酶标仪(芬兰雷勃公司生产，型号:Wellscan MK3)，AEC底物显色试剂盒(上海玉博生物科技有限公司公司提供)，ELISA的试剂盒(上海实业科华生物技术有限公司提供)，具体操作步骤严格遵守说明书进行实验。

1.3 检验方法

1.3.1 标本制作:将24例结直肠癌的活检组织作为研究组，取其距离肿瘤附近3～5 cm的直肠组织作为阴性参照组，再取21例妊娠周期在6周内行人工流产孕妇的滋养层细胞组织作为阳性参照组，在4℃下，以4%的多聚甲醛浸泡过夜，固定后，再经脱水、浸腊、以石蜡包埋等处理，制成组织切片。

1.3.2 ELISA法检测HLA-G表达:将切片置于50～60℃的烤箱内30 min，再以二甲苯脱蜡，经各级乙醇溶液进行水洗，再用磷酸缓冲液(PBS)反复冲洗3次，每次3 min，加入鼠抗人HLAG蛋白单克隆抗体以1∶1 000的工作浓度，在4℃下过夜或在37℃下孵育25～35 min，再次用磷……