苦参愈伤组织诱导及继代培养条件研究
2012-02-19齐香君
陕西科技大学学报 2012年4期
刘 瑶, 齐香君, 李 雅, 李 军
(1.陕西科技大学 生命科学与工程学院,陕西 西安 710021; 2.中国药科大学 国际医药商学院,江苏 南京 211198)
0 引言
中药苦参(SophoraflavescensAit.)为豆科槐属落叶灌木植物,具有清热燥湿、杀虫、利尿等功能.苦参中的苦参碱和氧化苦参碱具有良好的抗癌活性,对黑膀胱癌、色素瘤、胃癌等均有抑制作用[1].目前以苦参和其有效成分为原料开发了多种制剂并广泛用于临床[2].随着苦参制剂的开发,苦参药材的市场需求量在不断增加,2011年苦参市场价14元左右,在近几年内翻了4倍多.本研究旨在从中药资源可持续性发展考虑,对苦参愈伤组织诱导及继代培养条件进行研究,为药用植物苦参资源的可持续发展探索新的途径.
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1试剂
苦参种子购买于河北安国药材市场;乙腈(分析纯)、无水乙醇(分析纯)购于天津市红岩化学试剂厂;2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)植物激素均购于天津市科密欧化学试剂开发中心.MS培养基:Murashige and Skoog(1962)培养基.
1.1.2仪器设备
高效液相色谱仪:安捷伦高效液相色谱仪;培养箱:LRH-250-GSI智能人工气候箱.
1.2 方法
1.2.1苦参外植体制备
选颗粒饱满苦参种子,直接种植土壤中,室温发芽;或将种子做常规消毒处理[3]后接于MS培养基种,25±1℃,黑暗条件下发芽,培养一周左右后获得苦参幼芽;光照条件下继续生长两星期获得苦参幼苗.
1.2.2不同外植体对苦参愈伤组织诱导的影响
为了考察苦参愈伤组织诱导的最佳外植体,分别取苦参幼苗叶片、根、茎和苦参幼芽……
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