响应面法优化核桃ACE抑制肽的制备工艺研究
2012-02-16朱振宝周慧江易建华段光慧
朱振宝, 周慧江, 易建华, 段光慧
(陕西科技大学 生命科学与工程学院, 陕西 西安 710021)
0 引言
目前,全球大约有四分之一的高血压患者,预防和治疗高血压病是当今社会十分重要的 课题[1].血管紧张素转化酶(AngiotensinⅠ-Converting Enzyme,ACE)在血压调节中起着重要作用.目前用于降血压的药物中,通过抑制ACE的活性是其中一个重要途径[2,3].近年来,国内外对天然ACE抑制剂的研究报道较多,目前已经从多种动植物蛋白及下脚料中分离出多种降血压肽,采用的工艺技术主要包括从发酵食品中分离提取、从自溶产物中提取以及从蛋白质水解物中提取等[4].已有报道通过蛋白酶解酪蛋白、大豆蛋白、小麦胚芽蛋白、玉米蛋白、花生蛋白等[5-8]制备ACE抑制肽.
核桃蛋白属优质蛋白[9],含人体必需的8种氨基酸,据文献中对SDS-PAGE电泳图谱进行分析的结果表明[10],核桃蛋白是由两条多肽链紧密结合而构成的,其中一条肽段的相对分子质量是43~67 KDa,另一条为32~35 KDa,分子质量较小,有利于酶解的进行.目前国内外关于核桃ACE抑制肽的研究较少,本文探索了ACE抑制肽的制备工艺,为核桃ACE抑制肽的产业化及其构效关系提供理论依据.
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
核桃分离蛋白,实验室自制,纯度为80.1%;中性蛋白酶(Neutrase 0.8 L,0.8 AU/g),丹麦诺维信(Novo)公司; ACE (血管紧张素转化酶,来源于兔肺), HHL(马尿酰-组胺酰-亮氨酸)、马尿酸,购自Sigma公司;乙腈、三氟乙酸,色谱纯;其他试剂均为实验室常见分析纯级.
1.2 主要仪器与设备
PB-10型精密酸度计,赛多利斯科学仪器(北京)有限公司;501 A型超级恒温器,上海实验仪器厂有限公司;……
