但 霞，李 凯，朱成龙，刘树文,2,*

(1.西北农林科技大学葡萄酒学院，陕西 杨凌 712100；2.陕西省葡萄与葡萄酒工程技术研究中心，陕西 杨凌 712100)

苹果酸乳酸发酵即葡萄酒的二次发酵能够提高葡萄酒的香气，口感以及生物学稳定性，是葡萄酒品质提升的关键环节。苹乳发酵主要是由酒类酒球菌完成的，但在葡萄酒发酵过程中有多种乳酸菌的存在，这些乳酸菌主要分属于4个属：酒球菌(Oenococcus)、乳杆菌(Lactobacillus)、片球菌(Pediocooccus)和明串珠菌(Leuconostoc)[1]。其中酒球菌是公认的优良的葡萄酒苹乳发酵菌株，而乳杆菌、片球菌的代谢都对葡萄酒有一定的负面影响[2]。但是近年来的研究发现，乳杆菌对于苹乳发酵有积极的推动作用，包括提高葡萄酒pH值，增加酒球菌的耐受能力等[3]。此外，乳杆菌等均属也广泛存在于葡萄植株以及酒厂周围的环境中[4]，因此，深入研究非酒球菌属葡萄酒乳酸菌对于葡萄酒苹乳发酵有一定的积极作用。

单酶切扩增片段长度多态性(SE-AFLP)是从AFLP发展而来，该法在酶切时只使用一个限制性内切酶，反应之后的片段较少，但同样能够利用其多态性达到菌株区分的目的；并且此技术相对于AFLP更为简便，易操作，且重复性好，现已用于多种微生物的种内鉴定[4-8]。故本实验利用SE-AFLP技术对分离乳酸菌做种内鉴定，验证该法的可行性，这对于快速鉴定乳酸菌以及区别不同菌株，研究菌株基因差异等有重要意义。

1 材料与方法

1.1 材料、培养基与试剂

酒样：新疆产区2010年赤霞珠2份，晚红密1份；陕西产区2009年赤霞珠1份，美乐1份；……