猪伪狂犬病毒gB基因在大肠杆菌中的分段表达
2012-02-01包新奇黄绍华刘巧荣申屠芬琴康立平陈西钊
包新奇,黄绍华,刘巧荣,孙 明,杨 璐,申屠芬琴,康立平,陈西钊,4
(1.江苏省疾病预防控制中心,南京 210036;2.徐州市高校兽医站,徐州 221006;3.北京世纪元亨动物防疫技术有限公司,北京 100085;4.中国动物疫病预防控制中心,北京 100125)
伪狂犬 (Pseudorabies)又称奥捷士奇病(Aujeszky's,AD),是由伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)引起的包括多种病畜和野生动物共患的一种急性传染病[3]。猪是该病的自然宿主和贮存者。可引起妊娠母猪的流产,产死胎和木乃伊胎,新生仔猪的大量死亡。自1902年发现以来,伪狂犬病已在全球范围内流行,给世界养猪业造成了巨大的经济损失,成为严重危害养猪业的重大传染病之一。该病毒属于疱疹病毒科A疱疹病毒亚科,为双股线形DNA,约150 kb,编码70~100种蛋白。目前已经鉴定了 11种糖蛋白,其中 gB(glycoprotein B)是最主要的保护性抗原之一,能刺激机体产生补体依赖性和补体非依赖性的中和抗体以及病毒特异性的细胞免疫应答反应[1]。
gB基因在疱疹病毒成员中属于最保守的糖蛋白基因,在不同的疱疹病毒之间,gB蛋白的功能可以相互取代[2]。其大小约2.8 kb,编码913个氨基酸。拥有一段信号肽系列(N端的58个氨基酸)。成熟的gB蛋白C端有3个疏水区,其中最后一个疏水区为跨膜区(740~808 aa)。gB以二硫化物连接的三聚糖蛋白复合体的形式存在,即gBa,gBb和gBc,大小分别为855 aa(59~913 aa)、444 aa(59~502 aa)和411 aa(503~913 aa)。gBb和gBc是gBa剪切后的产物[4,5]。gB蛋白有多个抗原决定簇,其中59~126之间有3个连续的抗原决定簇,在214~279 aa之间有一个连续的抗原决定簇,在540~734 aa区间有8个潜在的非连续抗原决定簇,其中有两个位点位于540~646 aa之间[3]。根据 gB的以上特点,本研究将PRV的gB基因分4个片段进行表达和鉴定,为研制猪伪狂犬病gB抗体检测试剂盒奠定基础。……
