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三氧化二砷诱导乳腺癌细胞株MCF-7凋亡对端粒酶活性的影响

2012-01-25陈智嘉王景龙陈思嘉

中国药理学通报 2012年5期
关键词:乳腺癌

陈智嘉,谷 励,王景龙,陈思嘉

(1.吉林大学白求恩医学院药理学系,吉林长春 130021;2.吉林省临江市医院,吉林 临 江 134600;3.军事医学科学院11所,吉林 长春 130122)

乳腺癌是严重威胁妇女健康的恶性肿瘤之一,近年发病率逐年上升,且发病年龄也趋于年轻化。近年来研究发现As2O3不仅对APL细胞,而且对其他血液肿瘤细胞[1-2]和许多实体瘤细胞均具有诱导凋亡作用[3-4]。Wang 等[5]研究表明端粒酶与恶性肿瘤发生有着紧密的关联,p21特异性核苷酸序列能够抑制端粒酶的活性,诱导肿瘤细胞凋亡。也许端粒酶的活性指标在治疗恶性肿瘤的过程能提供新的策略。

本实验对As2O3对乳腺癌细胞的抑制作用及在不同浓度下端粒酶活性的变化进行了研究。以期为治疗乳腺癌的过程中提供新的理论依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与细胞株 纯试剂As2O3购自美国Sigma公司,配成(1 mmol·L-1),溶于 PBS 液,冻存;RPMI 1640、胎牛血清(FBS)、四甲基偶氮唑盐(MTT)、胰酶实验耗材等购自Gibco公司;DMSO(生工生物);RT-PCR kit宝生物工程(大连)有限公司;其他试剂均由吉林大学白求恩医学院药理学实验室提供。人乳腺癌细胞MCF-7株购自中科院上海细胞生物学研究所,本室自己传代保存。

1.2 细胞培养 细胞培养细胞采用开放式单层贴壁培养,培养液为RPMI 1640(含10%小牛血清,青霉素100 kU·L-1,链霉素 1 00 mg·L-1),培养条件为 3 7℃,5%CO2,相对饱和湿度。每日观察生长情况,贴壁2~5 d传代1次。传代时用0.25%胰酶消化后,加入培养液吹打制成细胞悬液,继续传代,并取对数生长期细胞进行实验。

1.3 MTT法 取对数生长期的MCF-7细胞系,制成每升约含有1×108个单细胞悬液。……

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