尿蛋白定性与定量检测方法分析
2012-01-23寇筱囡
中国现代药物应用 2012年5期
寇筱囡
正常尿液中仅含微量蛋白质,尿液中蛋白质含量超过150 mg/24 h的,尿蛋白的检测可用于初步判断肾脏的功能、协助诊断其他系统多种疾病、进行疾病的动态观察及疗效评判等。尿蛋白检查可分为定性和定量两大类试验。在进行尿蛋白定性时,应综合各种因素,具体情况具体分析,选择适宜的方法。尽管定性试验比较方便,但有时难以反映蛋白尿的实际含量,有条件时,最好进行定量检查。
1 尿蛋白定性检测
1.1 磺基水杨酸法 在酸性条件下,磺基水杨酸的磺酸根离子与蛋白质氨基酸阳离子结合,形成不溶性的蛋白盐沉淀,沉淀生成的程度可反映蛋白质含量。该法灵敏,极轻微反应无意义。判断结果应及时,否则会使阳性增高。
1.2 加热乙酸法 掌握加热乙酸法检测尿蛋白的原理、方法、注意事项及质量控制。加稀乙酸使尿液pH减低并接近蛋白质等电点(pH 4.7),促使变性凝固的蛋白质进一步沉淀,并可消除因加热使磷酸盐或碳酸盐析出造成的浑浊。为避免因盐类析出所致假性浑浊,操作时务必按照加热、加酸再加热的程序。加入乙酸的量要适当,约为尿量1/10,过多或过少均影响结果准确性。加热试管上段的尿液,以便与下段尿液形成对照。加热乙酸法是最经典、最准确的方法。
1.3 干化学试带法 了解常用干化学试带模块3~7的化学组成、操作方法及注意事项。利用指示剂的蛋白质误差原理,蛋白质与指示剂的离子(溴甲酚蓝、四溴酚蓝二酯)相结合生成复合物,引起指示剂的进一步电离超过尿液的缓冲能力,指示剂则发生颜色变化。……
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