冯宗刚 毛跟红 许 敏

郑州大学第二附属医院生殖中心 郑州 450014

精液白细胞对精子质量及IVF受精率的影响

冯宗刚 毛跟红 许 敏△

郑州大学第二附属医院生殖中心 郑州 450014

目的探讨精液中白细胞对精子质量以及对常规体外受精率的影响。方法分析35例门诊白细胞精子症患者及对照组的精子密度、活力、前向运动精子比例及精子畸形率。分析28例常规体外受精(IVF)白细胞精子症及其对照组的受精率。结果白细胞精子症患者精子密度、活力、前向运动精子比例均低于对照组，精子畸形率高于对照组，IVF受精率低于对照组。结论精液白细胞是可能造成精子质量下降，IVF受精率降低的原因之一，纠正白细胞精子症对于治疗男性不育，提高IVF受精率有重要意义。

白细胞精子症;IVF受精率;男性不育

目前，不孕不育的发病率呈明显上升趋势，其中男方因素约占40%［1］。女性生育力降低，男性精子质量下降是其根本原因。泌尿生殖道感染，精索静脉曲张，内分泌、染色体等因素均可对男性生育能力造成严重的影响。WHO规定［2］，精液中白细胞数量＞1×106/mL即为白细胞精子症。本研究通过对35例白细胞精子症患者的精子质量分析及28例白细胞精子症IVF受精率的研究分析，旨在探讨白细胞对男性精子质量及IVF受精率的影响。

1 材料和方法

1.1 对象选取 选取2011－01—2012－01在我院生殖中心就诊符合条件的患者133例，年龄20～45岁，平均(28.22±1.21)岁。其中35例为白细胞精子症的门诊患者(研究组)，以40例精液白细胞浓度正常患者作为对照组;另选28例在我中心行体外受精－胚胎移植(IVF－ET)助孕且为白细胞精子症的患者(IVF研究组)，以30例白细胞浓度正常患者作为IVF对照组。白细胞精子症组所有患者精液白细胞浓度＞1×106/mL，正常组白细胞浓度＜1×106/mL。

所有男性患者均排除内分泌、遗传、理化、精索静脉曲张等因素造成的精子质量异常，其中IVF的女方均以输卵管因素为指征，已排除年龄、内分泌以及卵子等原因造成的不孕。

1.2 标本采集 按照《WHO人类精液及处理实验室手册》(第5版)规定，取精前禁欲2～7 d，手淫取精，将全部精液收集于无菌干燥的容器中，25℃室温液化。

1.3 精液分析、白细胞计数及IVF受精率统计 用西班牙SCA计算机辅助精子质量分析系统分析每例标本精子密度、精子活动率、前向运动精子比例(a级+b级)等参数。Diff－Quick快速染色法计数精子畸形率;采用过氧化物酶染色法分析精液中白细胞浓度(所有试剂均来自深圳市博瑞德生物科技有限公司)。以IVF受精数与获卵数的比值作为IVF受精率。

1.4 统计学处理 采用SPSS 13.0软件，进行t检验和x2检验，均值以±s表示，P＜0.05差异有统计学意义。

2 结果

2.1 精液中白细胞对精子密度、活动率、前向运动精子比例以及畸形率的影响 见表1。

表1 2组精液中白细胞对精子质量的影响

由表1可知，与对照组相比，白细胞精子症组患者的精子密度、活动率、前向运动精子比例均有不同程度的降低，差异有统计学意义(P＜0.05);精子畸形率则明显高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。

2.2 精液中白细胞对常规IVF受精率的影响 见表2。

表2 精液中白细胞对常规IVF受精率的影响

由表2可知，与对照组相比，白细胞精子症组的常规IVF受精率低于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。

3 讨论

男性不育的原因十分复杂，遗传、内分泌、生殖道感染、精索静脉曲张、理化、环境等因素均可对精子质量造成影响，但目前仍有许多不育原因不明。白细胞精子症是男性生殖道感染的表现，其在男性不育中的发病率为10%～20%［3］。精液中白细胞多来自于前列腺或其他附属性腺。白细胞对精子的影响是多途径和机制的，活性氧(ROS)及炎性细胞因子是破坏精子膜结构和介导炎症反应的主要来源［4］。研究发现，精液白细胞特别是多形核白细胞和巨噬细胞激活增加，可释放比未激活白细胞多100倍的ROS［5］，白细胞吞噬过程中产生ROS，氧自由基可攻击精子细胞膜，使精子膜发生脂质过氧化导致膜的通透性和蛋白结构的改变，并对精子有毒性效应［6］。炎性介质γ－干扰素、TNF以及白介素家族的众多成员均能通过多种途径导致精子蛋白合成减少、成熟和功能障碍［7－8］，并且精液中大量白细胞还可以造成精子染色质异常和DNA的损伤，造成ATP生成减少，精子活动下降，畸形率增加［9－10］。本研究发现，白细胞精子症组患者的精子密度、活率、前向运动精子比例均不同程度低于非白细胞精子症组，而其畸形率高于非白细胞精子症组，这与上述文献结果相一致。

常规体外受精－胚胎移植(IVF－ET)是近年来新发展的一项辅助生殖技术，此技术的产生对于治疗女性输卵管因素造成的不孕具有革命性的意义。体外受精过程中，精子和卵子的质量是影响IVF受精率的关键因素。目前，国内尚未发现有关精液白细胞对IVF受精率影响的文献报导，本研究在排除女性内分泌、遗传等影响卵子质量的因素后，通过比较白细胞精子症与非白细胞精子症的IVF受精率发现，白细胞精子症组患者的受精率明显低于非白细胞精子症组，分析其原因，可能是白细胞产生的ROS及白细胞介素等炎症介质造成了对精子膜、顶体、DNA的损伤及其运动能力的下降，最终导致IVF受精率的降低。

近年来，男性生殖健康形势十分严峻，白细胞精子症是造成精子质量下降、男性不育的因素之一，分析精液白细胞含量对于寻找男性不育病因，评估IVF受精率有重要意义，同时发现白细胞精子症感染，应积极寻找病因并及时纠正。

［1］贺昌海.不孕不育现代诊治技术［M］.上海:复旦大学出版社，2003:42－43.

［2］WHO.WHO人类精液及处理实验室手册［M］.北京:人民卫生出版社，2011:192.

［3］Alvarez JG，Sharma RK，Ollero M，et al.Increased DNA damage in sperm from leukocytospermic semen samples as determined by the sperm chromatin structure assay［J］.Fertil steril，2002，78:319－329.

［4］刘靖，王益鑫，吴裕伦，等.白细胞精子症病人精浆活性氧与细胞因子检测及评价［J］.中华男科学，2003，9(2):103－105.

［5］Sheweita SA，Tilmisany AM，Al－Sawaf H，et al.Mechanisms of male infertility:role of anti oxidants［J］.Curr Drug Metab，2005，6(5):495－501.

［6］王海燕，胡涛，高美华，等.不育症患者精浆白细胞介素－6与肿瘤坏死因子检测及意义［J］.中国计划生育学杂志，1999，3:131－133.

［7］Kobayashi H，Gil－Guzman E，Mahran AM，et al.Quality control of reactive oxygen species measurement by luminol－dependent chemiluminescence assay［J］.J Androl，2001，22(4):568－574.

［8］刘雅峰，周灿权，欧建平，等.前列腺液白细胞含量与男性不育的相关性分析［J］.中国优生遗传学杂志，2008，16(1):104－105.

［9］龚平，周志兰，王昌富.精液中白细胞与精子动态参数相关性研究［J］.中国优生与遗传杂志，2007，15(5):102－104.

［10］吴励梅，李林，吕伟标，等.男性不育患者精子形态及质量与精液白细胞的关系［J］.临床医学工程，2010，17(10):54－55.

The effects of leukocytes in semen and sperm quality and in vitro fertilization(IVF)rates

Feng Zonggang，Mao Genhong，Xu Min，Department of Reproduction Center，the Second Affiliated Hospital of Zhengzhou University，Zhengzhou 450014，China

ObjectiveTo investigate the effects of leukocytes in semen on sperm quality and in vitro fertilization rates.MethodsParameters including sperm quality of 35 leukospermia samples from outpatients and in vitro fertilization rates of 28 leukospermia samples from IVF assisted patients were tested and analysed with their control groups.ResultsCompared with control groups，leukospermia samples got lower sperm density，lower progressive motility and total motility percentages，higher teratozoospermia rates and lower IVF rates.ConclusionThe leucocyte in semen can lead sperm quality decline and low IVF rate，curing leukospermia contribute to curing male infer tility and raising IVF rate.

Leukospermia;In vitro fertilization rate;Male infertility

R698+.2

A

1007－8991(2012)04－0009－02

△通讯作者:主管技师，Tel:0371－63974617

(收稿 2012－02－11)