杨娴娴 Jodie T Hatfield Susan J Hinze 穆雄铮 Peter J Anderson Barry C Powell

新致病基因在颅缝早闭Crouzon综合征中的初步机制研究

杨娴娴 Jodie T Hatfield Susan J Hinze 穆雄铮 Peter J Anderson Barry C Powell

目的 研究 Rbp4（Retinol binding protein 4）、Gpc3（Glypican family of growth factor binding protein 3）、C1qtnf3（Collagenous repeat-containing sequence of 26 KDa protein）等新致病基因在颅缝早闭症中的发病机制，为疾病非手术治疗奠定理论基础。方法 以Crouzon综合征Fgfr2cC342Y/+小鼠为实验模型，应用MicroCT和组织学染色，研究小鼠颅缝闭合模式；以Fgfr2cC342Y/+模型，RT-qPCR研究Rbp4、Gpc3、C1qtnf3等新致病基因的表达差异，初步探讨其在颅缝闭合过程中的调控作用；以体外培养的Fgfr2cC342Y/+小鼠颅缝细胞为模型，研究基因突变动物细胞增殖与代谢改变。结果 获得Fgfr2cC342Y/+小鼠后额缝、冠状缝、人字缝、矢状缝等颅缝闭合模式，随颅骨发育、颅缝闭合，OC（Osteocalcin）、ALP（Alkaline phosphatase）表达增加，目的基因 Rbp4、Gpc3、C1qtnf3 表达下降，Msx2（Muscle segment homeobox gene 2）表达增加，杂合子与野生型小鼠之间均存在显著统计学差异，与前期人颅缝组织Microarray研究结果一致。Gpc1（Glypican family of growth factor binding protein 1）、FliI（Flightless I）在颅缝闭合中的表达较恒定，野生型与杂合子之间未见明显统计学差异。体外培养Fgfr2cC342Y/+小鼠颅缝细胞，CellTiter96 MTS和Quant-iT Picogreen dsDNA细胞增殖与代谢分析结果显示，Fgfr2功能获得性突变可促进冠状缝细胞的增殖，从而导致成骨增加，颅缝早闭。结论 Fgfr2cC342Y/+模型新致病基因表达趋势与前期人颅缝组织Microarray研究结果一致，Rbp4、Gpc3、C1qtnf3可能在颅缝早闭中具重要调控作用。

颅缝早闭症 Fgfr2cC342Y/+小鼠 Crouzon综合征 RT-qPCR 微量CT Rbp4 Gpc3 C1qtnf3

颅缝早闭症是一种常见的先天性颅颌面畸形，新生儿中发病率约为1/2 500，仅次于唇腭裂畸形。由于颅缝提早发生骨性闭合，导致颅腔狭小、颅面骨畸形、颅内压增高等复杂的颅颌面畸形综合征，如Crouzon综合征、Apert综合征等。严重者可引起视力减退甚至失明、脑发育受阻及智力发育障碍，严重影响了患儿的正常发育、生理功能，对患儿的社会生活和心理健康产生了诸多的负面效应，甚至可在发育过程中因危险的并发症而危急生命[1]。……