宫黎明，方 宁，陈代雄*，万卫红，章 涛，余丽梅，赵春华

(1.遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室，贵州遵义563003;2.中国医学科学院基础医学研究所组织工程中心，北京100005)

人羊膜上皮细胞在大鼠受损肝组织中分化为肝细胞

宫黎明1，方 宁1，陈代雄1*，万卫红1，章 涛1，余丽梅1，赵春华2

(1.遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室，贵州遵义563003;2.中国医学科学院基础医学研究所组织工程中心，北京100005)

目的 探讨人羊膜上皮细胞在大鼠损伤肝原位植活及向肝细胞分化。方法 用胰蛋白酶消化法从羊膜组织中分离人羊膜上皮细胞(hAECs)，用流式细胞术和免疫荧光染色进行表型分析和细胞鉴定。腹腔注射D-氨基半乳糖溶液建立大鼠肝损伤模型，随机分为hAECs移植组和对照组，每组20只。造模后24 h用微量注射器于肝左、中、右叶3点分别移植L-DMEM悬浮的hAECs悬液50 μL(约1×106个细胞)，对照组注射等量L-DMEM。于移植后48 h、1、2和4周处死各实验组5只大鼠，取肝脏制备冰冻切片，用免疫荧光双染色检查hAECs在受损肝原位的植活、分布及其向肝细胞分化的标志物表达。结果 1)FCM分析和免疫荧光染色结果显示，所分离的hAECs表达CD29、CD166及CK19，几乎不表达CD44、CD80、CD86、HLA-DR及波形蛋白;2)免疫荧光双染色结果显示，hAECs移植后1周主要定植于肝小叶且表达AFP，至2周表达CK18，至4周表达Alb。结论 hAECs在大鼠受损肝组织中能被植活且可分化为肝细胞，提示hAECs移植在临床肝病的治疗方面可能具有潜在应用价值。

人羊膜上皮细胞;移植;分化;肝细胞;肝损伤

人羊膜上皮细胞 (human amnion epithelial cells，hAECs)在特定的体外诱导培养条件下，可分化成来自3个胚层的各种细胞，包括神经细胞、心肌细胞、成骨和软骨细胞、胰岛素分泌细胞等［1－5］。……