侯传强 李宝江

(泰山医学院附属泰山医院乳腺外科，山东 泰安 271000)

肢体淋巴水肿是常见疑难病，国际淋巴学会估计，全世界大约4500万人患有肢体淋巴水肿。患肢常并发慢性炎症，皮肤及皮下组织增厚，胶原沉积，最终形成象皮肿,严重影响到病人工作生活，目前尚无确切疗效的治疗方法。

1 材料和方法

1.1 实验动物和试剂

实验用新西兰大白兔均购自山东省农业科学院实验兔场,共15只，平均2.5 kg，不限雌雄。采用右后肢作为实验肢体，左后肢作为对照。兔抗人FLT-4多克隆抗体购自Zymed 公司，兔抗人VEGF-C单克隆抗体购自武汉博士德公司，rhVEGF-C购自美国Biovision公司,鼠来源vWF多克隆抗体购自Santa Cruz 公司。

1.2动物模型制作 动物用2.5%的戊巴比妥钠麻醉,之后右后肢脱毛、消毒,于趾蹼皮内注射亚甲蓝注射液0.5 ml以标记淋巴管，大约10 min可显示股深部淋巴管,环形切除腹股沟以远3 cm宽的皮肤及皮下组织，清扫腹股沟淋巴结，切除部分蓝染的淋巴管并结扎其断端，皮肤内翻缝合于肌肉。术后3天使用60Co一次性给予2000 cGry剂量照射局部。4个月后获得持续性淋巴水肿的实验模型，共12只。

1.3实验动物分组及方法 淋巴水肿模型兔12只，随机分为2组，每组6只：实验组水肿局部注射VEGF-C，对照组注射生理盐水。VEGF-C稀释液制备：VEGF-C冻干粉(10 μg/支)用0.1%乙酸溶液稀释至6 ng/μl，小瓶分装，-80 ℃冰箱保存。注射时再次稀释至浓度为50 ng/ml。VEGF-C稀释液(每只动物注射10 ml)或生理盐水均匀注射到兔后肢手术创伤、射线照射区域、水肿软组织包括皮肤瘢痕，皮下组织及肌肉等组织，对照组注射生理盐水。……