Pokemon和P14ARF蛋白在肝细胞癌组织中的表达及临床意义
2012-01-09覃思繁林思彤韦常宏
陈 军 覃思繁 林思彤 韦常宏
Pokemon基因即POK红系髓性致癌因子(POK erythroid myeloid ontogenic factor)是2005年被确定的1种原癌基因[1],其蛋白产物不仅可以使癌细胞获得抗老化和抗死亡的能力,还能调控其他癌基因或抑癌基因的活性。Pokemon过表达导致ARF降低,通过MDM2使p53突变增加,最终导致肿瘤的发生,因此Pokemon被认为是肿瘤的总开关[2]。本研究检查原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma HCC)组织及相应癌旁组织中Pokemon和P14ARF蛋白的表达情况,以了解它们在人原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义。
1 材料与方法
1.1 一般资料
60例肝癌组织,取自广西医科大学附属肿瘤医院2008年8月~2009年8月肝癌患者手术切除的标本,经术后病理诊断为肝细胞癌。60例中男性42例,女性18例,年龄22~65岁,平均年龄(42.3±12.1)岁,中位年龄46岁。所有患者术前均未行任何治疗。按UICC 2002年TNM分期,根据按Edmondeon 病理分级标准进行组织学分级。每例均取癌及对应癌旁肝组织(距肿瘤边缘2 cm)。
1.2 方法
免疫组织化学检查采用Envision两步法。Pokemon浓缩型兔抗人多克隆抗体购自英国Abcam公司,抗体稀释浓度为1∶100。P14ARF兔抗人多克隆抗体购自福州迈新生物技术科技公司,抗体稀释浓度为1∶100。即用型快捷MaxvisionTM检测试剂盒购自福州迈新生物技术科技公司。整个过程按试剂盒说明书进行。每批染色均设已知阳性切片作阳性对照,用磷酸盐缓冲液(phosphatic buffered saline,PBS)代替一抗作阴性对照。
1.3 结果判断
Pokemon及P14ARF表达产物主要定位于细胞质,呈棕黄色颗粒为阳性细胞。由2位医师采用双盲法观察每张切片。阳性判断根据染色程度和免疫阳性细胞占肿瘤细胞总数百分比综合记分。……
