叶良红，朱红云, 李芸霞

大黄附子相互配伍应用首见于《金匮要略》大黄附子汤，是体现中医用药特色—中药配伍的代表药对之一。大黄苦寒攻下泄热，附子辛热散寒，寒热并用，相反相成，首创温下先河。主寒实内结证。寒实内结者，非温不能散其寒，非下不能去其积。而方中大黄性苦寒，不宜用之，但得附子之辛热，则大黄苦寒之性被制，而泻下之用犹存，共奏温下之功。附子、大黄是温下的经典药对，治寒实证用大黄就是去性取用[1]。本实验采用响应曲面法对大黄附子药对中游离蒽醌和结合蒽醌的提取工艺进行优化，以便对该药进行进一步研究。

1 仪器与材料

Varian-210高效液相色谱仪（瓦里安公司）；K Q5200E型超声机 (昆山市超声仪器有限公司)，频率为40khz；大黄素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110756-200110）；大黄酸对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110757-200206）；大黄素甲醚对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110758-200912）；大黄酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号：A0046）；芦荟大黄素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110795-200806）。HPLC所用溶剂均为色谱纯，所用水为乐百氏纯净水，论文中涉及的其他试剂均为分析纯。大黄，附子购自同仁堂大药房，拣选清洗，粉碎，过四号筛。

2 方法

2.1 色谱条件

色谱柱为Hypersil ODS C18柱 (250mm×4.6mm,5µm)；流动相为乙醇:1%冰醋酸水溶液(70:30，v/v); 流速为1.0mL.min-1；柱温为35 ℃；进样量为20μL；测定波长为254nm。

2.2 标准溶液的制备

精密称取大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚对照品适量，分别置于五个25mL容量瓶中，用色谱甲醇稀释至刻度，得对照品储备液。……