Hela细胞雄激素受体基因外显子1的甲基化检测*
2011-12-07李笑竹赵贵森岳阳阳翟仙敦艾红伟薛小琦
李笑竹,赵贵森,岳阳阳,翟仙敦,艾红伟,薛小琦
河南科技大学法医学院法医物证学教研室洛阳 471003
#通讯作者,男,1972年12月生,博士,副教授,研究方向:分子遗传学,E-mail:lyfy@mail.haust.edu.cn
Hela细胞雄激素受体基因外显子1的甲基化检测*
李笑竹,赵贵森#,岳阳阳,翟仙敦,艾红伟,薛小琦
河南科技大学法医学院法医物证学教研室洛阳 471003
#通讯作者,男,1972年12月生,博士,副教授,研究方向:分子遗传学,E-mail:lyfy@mail.haust.edu.cn
雄激素受体;DNA甲基化;Hela细胞
目的:检测Hela细胞雄激素受体(AR)基因外显子1的甲基化水平。方法:用亚硫酸氢盐克隆测序法和联合亚硫酸氢盐的限制酶法(COBRA)检测不同来源Hela细胞AR基因外显子1的甲基化水平,BiQ Analyzer软件分析测序结果。结果:在非CpG胞嘧啶转化率>98%的前提下,Hela细胞AR基因外显子1片段的总甲基化率≥96.2%,除第8个CpG位点外,其他CpG位点均为完全甲基化或高甲基化。COBRA法与测序法结果一致。结论: DNA甲基化可能是Hela细胞AR基因失活的分子机制。
Hela是一种感染HPV的宫颈癌细胞株,因为没有内源性雄激素受体(androgen receptor,AR)表达,在激素研究中广为应用[1]。但Hela细胞AR失活的机制尚不清楚。有研究[2]表明,HPV感染的细胞易发生AR基因的甲基化。结合雄激素对女性生殖道上皮的抗增殖作用,作者推测AR甲基化可能参与了HPV相关宫颈癌的发病过程。该研究调查Hela细胞AR基因外显子1的甲基化状态,初步探讨HPV相关宫颈癌细胞AR基因失活的分子机制。
1 材料与方法
1.1 材料 不同来源的Hela细胞由华中科技大学同济医学院免疫系、病理系,同济医院妇产科研究室以及河南科技大学医学院病理系分别提供。……
