杜氏盐藻FLA8基因全长的克隆及鉴定*
2011-12-07李俊平毛丽红薛乐勋
李俊平,刘 岷,毛丽红,石 科,李 靓,许 尧,薛乐勋
郑州大学生物工程系细胞生物学研究室郑州 450001
#通讯作者,男,1944年2月生,教授,博士研究生导师,研究方向:肿瘤标志物与基因工程,E-mail:xuelx@zzu.edu.cn
杜氏盐藻FLA8基因全长的克隆及鉴定*
李俊平,刘 岷,毛丽红,石 科,李 靓,许 尧,薛乐勋#
郑州大学生物工程系细胞生物学研究室郑州 450001
#通讯作者,男,1944年2月生,教授,博士研究生导师,研究方向:肿瘤标志物与基因工程,E-mail:xuelx@zzu.edu.cn
杜氏盐藻;FLA8基因;驱动蛋白-2
目的:获得FLA8基因cDNA序列。方法:根据衣藻、小球藻等驱动蛋白-2亚基的氨基酸高度保守序列GYNGTIF、NEDPKDA设计一对简并引物,采用RT-PCR及3’RACE和5’RACE的方法扩增杜氏盐藻FLA8基因的全长。结果:克隆得到的杜氏盐藻FLA8基因cDNA全长序列为2 612 bp,序列分析显示其包括90 bp的5’UTR、167 bp的3’UTR以及2 355 bp的开放阅读框,其编码784个氨基酸残基,蛋白质的理论等电点为6.65,相对分子质量为85 097。氨基酸序列同源性分析显示其与其他物种有较高的同源性:团藻(98%)、衣藻(99%)、小球藻(92%)。结论:得到杜氏盐藻驱动蛋白-2亚基FLA8的基因全长。
鞭毛/纤毛在感知和向细胞内传递外界环境信号的过程中担任重要角色,多囊肾疾病、癌症等多种发育异常均与纤毛缺陷相关[1]。近年来,以有鞭毛的低等生物作为模式生物来研究鞭毛/纤毛相关性疾病成为一个重要的研究方向[2],但到目前为止,鞭毛长度的调控机制依然不清楚[3-4]。鞭毛的组装由鞭毛内转运(intraflagellar transport,IFT)调控,分别由正向运输和逆向运输完成,鞭毛内颗粒从基体沿着轴丝运输到鞭毛顶部的正向运输是通过驱动蛋白(kinesin-2)进行的,而由鞭毛顶端向基体的逆向运输则通过动力蛋白(Dynein)进行。……
