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特发性血小板减少性紫瘢患者外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞的变化及临床意义

2011-12-03佟海侠马良艳陆春伟王秋实

中国医科大学学报 2011年10期
关键词:检测

佟海侠,马良艳,陆春伟,王秋实

(1.中国医科大学附属盛京医院输血科,沈阳110022;2.中国医科大学公共卫生学院卫生检验教研室,沈阳110001)

特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)是一种常见的出血性自身免疫病,但发病机制尚未完全明了,难以找到真正特异而有效的治疗方法。近年来,越来越多的研究表明,ITP患者除有体液免疫异常外,都存在细胞免疫异常,发病与淋巴细胞亚群、细胞因子表达及功能改变有密切联系[1]。同时研究发现调节性T细胞(T regulatory cell,Treg细胞)是维持机体免疫耐受的重要调控者,在自身免疫病中的作用逐渐成为研究的热点。为了观察淋巴细胞免疫功能在ITP发病机制中的可能作用及Treg细胞与ITP发生、发展的关系及其临床意义,我们使用流式细胞分析仪检测40例初诊急性ITP患者外周血淋巴细胞亚群的水平和Treg细胞的数量,并与40例健康者进行比较,以观察其在ITP发病中的变化和临床意义。

1 材料与方法

1.1 临床资料

1.1.1 研究对象及分组:全部为中国医科大学盛京医院血液科门诊及住院初诊(治疗前)急性ITP患者,诊断根据临床血象和骨髓检查确诊,符合张之南《血液病诊断及疗效标准》[2],ITP组40例,男18例,女22例,年龄3~43岁,中位年龄18岁;健康对照组40例,男24例,女16例,年龄19~54岁,中位年龄35岁。

1.1.2 主要试剂和仪器:MultiSET四色免洗淋巴细胞亚群试剂盒、FACS Lysing Solution红细胞裂解液、人调节性 T细胞检测试剂盒(CD25-APC、CD4-FITC、Foxp3-PE)购自美国 BD 公司;FACSCalibur流式细胞仪为美国BD公司产品。

1.2 方法

1.2.1 淋巴细胞亚群检测方法:采集外周静脉血2.0 mL,EDTA-K2抗凝后备用。取2支FACS专用试管,各加入50 μL充分混匀的抗凝全血,分别加入20 μL CD3/CD8/CD45/CD4 抗体和20 μL CD3/CD16+56/CD45/CD19标记的抗体。……

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