曹兴元,白如念,罗应武,吴聪明

(1.中国农业大学动物医学院,北京 海淀 100193;2.北京市畜牧兽医总站,北京 朝阳 100185;3.北京市怀柔区动物疫病预防控制中心,北京怀柔101400)

金黄色葡萄球菌(以下简称金葡菌)对氟喹诺酮类药物的耐药性问题已引起人们极大的关注,并且对耐氟喹诺酮类药物的金葡菌的靶位点突变机制进行了广泛研究,国内学者初步探讨了多重耐药转运蛋白NorA介导的氟喹诺酮耐药机制[1-2]。目前已经证实,金葡菌中的多重耐药转运蛋白NorA,NorB和NorC均介导氟喹诺酮类药物的耐药性,并且NorA[3],NorB[3]和NorC[4]均为细菌中常见的主要易化子家族类的由质子力驱动的外排泵[5]。本文采用临床分离的牛乳源环丙沙星耐药的金葡菌,通过建立的高效液相色谱法(HPLC-FLD),测定了临床分离的耐药、敏感菌及金葡菌标准菌株ATCC 29213在加入一种质子驱动力的阻断剂氰氯苯腙(CCCP)前后对环丙沙星蓄积量的差异,为深入研究外排泵介导的耐药机制提供了试验用菌株,同时为临床检测通过外排泵介导耐药的金葡菌提供了方法学上的依据。

1 材料与方法

1.1 菌株 27株野生环丙沙星耐药金葡菌、3株野生环丙沙星敏感金葡菌和1株金葡菌标准菌株ATCC 29213。

1.2 药品与试剂 环丙沙星标准品购自中国药品与生物制品检定所。乙腈,色谱纯,购自Dikma公司;磷酸,三乙胺,盐酸,甘氨酸等均为色谱纯。氰氯苯腙(CCCP)购自美国Sigma公司。

1.3 MIC测定 对30株临床分离的牛乳源金葡菌进行环丙沙星的最小抑菌浓度(MIC)测定,参照(NCCLS)推荐的微量肉汤稀释法进行[6]。……