神经生长因子对肝星状细胞胶原分泌及形态学的影响*
2011-11-20舒建昌朱海燕何雅军陈莲香叶国荣
舒建昌, 朱海燕, 吕 霞, 何雅军, 陈莲香, 叶国荣
(暨南大学附属广州红十字会医院 消化内科,广东 广州 510220)
神经生长因子对肝星状细胞胶原分泌及形态学的影响*
舒建昌△, 朱海燕, 吕 霞, 何雅军, 陈莲香, 叶国荣
(暨南大学附属广州红十字会医院 消化内科,广东 广州 510220)
目的: 观察神经生长因子(NGF)对大鼠肝星状细胞(HSCs)胶原分泌功能和形态学的影响,探讨NGF抗肝纤维化的作用机制。方法大鼠肝星状细胞株(HSCs-T6)经不同浓度NGF作用24 h后,ELISA法检测上清液中Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量;通过倒置显微镜、吖啶橙染色及透射电镜观察形态学变化。结果NGF作用HSCs 24 h后培养上清中Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量与对照组相比明显减少(Plt;0.05),但无剂量依赖性。倒置显微镜下可见细胞数目变少,细胞变小,形态向椭圆形或圆形改变;吖啶橙染色及透射电镜可以见到细胞凋亡的形态学变化。结论NGF可抑制HSCs合成Ⅰ、Ⅲ型胶原,诱导HSCs凋亡,抑制HSCs胶原分泌,可能是NGF抗肝纤维化的作用机制。
肝星状细胞; 胶原; 形态学; 神经生长因子
肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)又名Ito细胞、窦周细胞等,其激活是肝纤维化发生的中心环节。活化的HSCs大量合成和分泌胶原等细胞外基质(extracellular matrix,ECM),由于细胞外基质的合成与降解失平衡,合成增多,降解减少,使大量细胞外基质沉积,最终引起肝纤维化、肝硬化。近年来神经生长因子(nerve growth factor,NGF)在肝纤维化中的作用越来越受到关注[1-3]。本研究观察了NGF对HSCs胶原分泌及形态学的影响,以帮助探讨NGF抗肝纤维化作用的机制。
材 料 和 方 法
1材料
NGF购自Ramp;D;吖啶橙购自Sigma;DMEM培养液、胎牛血清购自Gibco;……
