朱晓峰， 张荣华， 孙升云， 王攀攀， 杨 丽， 韩 莉， 金 玲

(暨南大学 1附属第一医院中医科，2药学院中药学教研室，广东 广州 510630)

淫羊藿素通过雌激素受体和骨形态发生蛋白信号诱导MC3T3-E1 subclone 14细胞分化*

朱晓峰1， 张荣华2△， 孙升云1， 王攀攀2， 杨 丽2， 韩 莉1， 金 玲1

(暨南大学1附属第一医院中医科，2药学院中药学教研室，广东 广州 510630)

目的： 观察淫羊藿素(ICT)对MC3T3-E1 subclone 14前体成骨细胞株增殖、分化的影响，以及雌激素受体(ER)和骨形态发生蛋白(BMP)信号在分化中的作用。方法WST-8、BrdU法检测ICT对MC3T3-E1 subclone 14细胞活力和增殖的影响；ICI182780阻断ER受体信号后，检测ICT和noggin对MC3T3-E1 subclone 14细胞碱性磷酸酶(ALP)活性、I型胶原(Col I)和骨钙素(BGP)的影响；实时荧光PCR检测ICT对BMP-2、4、7 mRNA表达的影响；Western blotting检测ER受体信号阻断后，ICT对Smad1/5/8蛋白磷酸化的影响。结果ICT(0.1 μmol/L、1 μmol/L)可以提高MC3T3-E1 subclone 14细胞ALP、Col I、BGP和矿化结节数量(Plt;0.01或Plt;0.05)，表明ICT有促分化的作用，但对细胞活力和增殖指数无明显影响；阻断ER受体信号后，ICT促分化作用明显下降(Plt;0.01)；ICT可以提高BMP-2、4 mRNA的表达(Plt;0.01)，但对BMP-7 mRNA无作用(Pgt;0.01)；阻断ER信号后，ICT 促Smad1/5/8磷酸化明显减弱(Plt;0.01)。进一步阻断BMP/Smad信号可以抑制ICT促分化的作用(Plt;0.01)。结论ICT可以通过ER受体激活BMP/Smad信号通路，进而促进MC3T3-E1 subclone 14细胞的分化。

淫羊藿素； 成骨细胞； 受体，雌激素； 骨形态发生蛋白

淫羊藿素(icaritin，ICT)为补肾壮骨中药淫羊藿的主要成分淫羊藿苷的体内代谢产物，已有研究显示ICT可以促进成骨细胞(osteoblasts，OB)分化[1]，但对其具体作用靶点和作用机制缺乏进一步研究。传统认为补肾中药的黄酮类、香豆素类等活性成分具有类雌激素生物活性，ICT的化学结构上3、7位羟基化使其具有了类雌激素的活性结构，那么ICT影响OB分化是否依赖雌激素受体(estrogen receptor，ER)信号通路？……