郝艳鹏, 张 悦△, 刘煜敏, 陆 敏, 王 飞, 陆海英

(上海中医药大学1科技实验中心，2护理学院，上海 201203)

六味地黄丸含药血清对HK-2细胞TGF-β/Smad信号通路的影响*

郝艳鹏1, 张 悦1△, 刘煜敏1, 陆 敏1, 王 飞1, 陆海英2

(上海中医药大学1科技实验中心，2护理学院，上海 201203)

目的观察六味地黄丸含药血清对HK-2细胞增殖及其Smad通路信号影响。方法MTT法检测大鼠5%、10%、20%空白血清与5%、10%、20%含药血清对HK-2细胞增殖的影响，并采用蛋白印迹法检测10%含药血清对HK-2细胞Smad通路信号分子蛋白表达的影响。结果六味地黄丸含药血清可以促进HK-2细胞增殖；在HK-2细胞中，TGF-β1可明显促进Smad2蛋白的磷酸化，而10%六味地黄丸含药血清具有明显的抑制效应。10%六味地黄丸含药血清亦可促进SnoN蛋白表达，明显高于对照组和空白大鼠血清组。结论六味地黄丸含药血清能够抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞Smad2蛋白的磷酸化，促进TGF-β/Smad通路的负性调控因子SnoN蛋白的表达。

六味地黄丸； 肾小管上皮细胞； 信号转导； 蛋白表达

转化生长因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)是公认的促纤维化细胞因子之一。在病理条件下，TGF-β通过其受体介导的Smads信号转导通路调节靶基因的表达，从而促进纤维化的发生和发展。因此，限制和逆向调控TGF-β/Smad信号的转导是治疗肾纤维化的关键。有研究表明传统中医药可以通过调控TGF-β/Smad信号的转导而发挥防治肾纤维化的作用[1],而且,六味地黄丸可延缓肾组织的纤维化[6]。本研究进一步观察六味地黄丸含药血清对肾小管上皮细胞的TGF-β/Smad信号通路是否有逆向调控的作用？

材 料 和 方 法

1材料

1.1动物 健康雄性Wistar大鼠(180 g±20 g)20只，清洁级，上海斯莱克实验动物有限责任公司提供,合格证号为SCK(沪)2008-0016，上海中医药大学医学实验动物中心按照SPF级饲养。……