汪 泱， 张立行， 王共先， 谢 安， 娄远蕾， 阮琼芳， 崔苏萍， 杨 阳

(南昌大学泌尿外科研究所, 江西 南昌 330006)

后肾细胞微环境诱导胚胎干细胞向肾系细胞分化的实验研究*

汪 泱△， 张立行， 王共先， 谢 安， 娄远蕾， 阮琼芳， 崔苏萍， 杨 阳

(南昌大学泌尿外科研究所, 江西 南昌 330006)

目的探讨胚胎后肾细胞微环境诱导胚胎干细胞(ESCs)分化为肾系细胞的作用。方法小鼠D3系胚胎干细胞通过悬滴法制备拟胚体(EBs)，将EBs细胞与取自孕12.5 d小鼠胚胎的后肾细胞通过间接共培养以诱导其分化，即为共培养诱导组，设EBs细胞自然分化为对照组；采用免疫荧光染色法检测共培养第3、5、7 d后的EBs细胞Pax2、WT-1蛋白表达情况，通过逆转录PCR法检测诱导3 d后的EBs细胞Pax2、WT-1、Lim1、Sall1、Emx2、GDNF、Wnt4、BMP7、Nephl、Nephrin、KSP和CD24 mRNA的表达情况。结果EBs细胞在诱导的第3 d即出现了全部肾发育相关基因的表达，其中共培养组Pax2、WT-1、Emx2、GDNF、Nephl、Nephrin、KSP和CD24的表达强于对照组；免疫荧光结果显示在诱导3 d后的EBs细胞中可观察到Pax2阳性细胞，阳性细胞数在共培养第5、7 d增多；诱导5 d后可观察到WT-1阳性细胞，对照组未见Pax2或WT-1蛋白阳性细胞出现。结论后肾细胞微环境可促进ESCs分化为肾系细胞。

胚胎干细胞； 后肾细胞； 肾系细胞

急性肾衰竭的主要病因是各种原因导致的急性肾小管损伤，其转归依赖于肾内存留的正常肾细胞数或具有修复作用的成体肾干细胞数目。目前，研究者致力研究修复损伤肾脏的方向之一是利用干细胞补充受损的肾细胞，其可能细胞来源包括胚胎干细胞(embryonic stem cells, ESCs)和自体的各种成体干细胞。成体干细胞的多向分化能力有限，而ESCs可分化为成体器官内不同胚层的所有细胞，显示出其独特的优势。……