牛初乳中sIgA双抗夹心ELISA检测方法的建立

2011-10-19朱洪艳赵红宇周盛华高学军

中国乳品工业 2011年3期

关键词：实验检测方法

朱洪艳，赵红宇，周盛华，高学军

（1.黑龙江康普生物科技有限公司，哈尔滨150000；2.东北农业大学乳品科学教育部重点实验室，哈尔滨150030）

牛初乳中sIgA双抗夹心ELISA检测方法的建立

朱洪艳1，赵红宇1，周盛华1，高学军2

（1.黑龙江康普生物科技有限公司，哈尔滨150000；2.东北农业大学乳品科学教育部重点实验室，哈尔滨150030）

为定量检测牛初乳中sIgA，建立双抗夹心ELISA方法。以牛初乳中的sIgA为抗原，免疫新西兰白兔，制得抗血清，经纯化后作为包被抗体；利用简易过碘酸钠法对兔抗牛sIgA标记辣根过氧化物酶(HRP)，制得酶标抗体；通过方阵滴定法确定ELISA最佳工作条件；进行特异性、重复性、稳定性实验并且检测牛初乳粉样本中的sIgA含量。结果：成功建立了一种定量检测牛初乳中sIgA的双抗夹心ELISA方法。该方法线性范围：15.625～1 000 μg/L；最低检测限（LOD）为15.625 μg/L；精密度为：批内CV=4.8%；批间CV=6.5%。

ELISA，sIgA，牛初乳

0 引言

sIgA是外分泌液中存在的主要抗体，它具有和人初乳相同的免疫源性，是呼吸道、消化道、泌尿生殖道等抵御病毒、细菌等病原及有害物质入侵的第一道免疫屏障。研究发现sIgA能聚集细菌和病毒形成复合物，而易被黏膜屏障所阻挡或通过粪便、痰液及鞘膜液等分泌作用排出体外，是人体黏膜免疫的主要抗体[1-3]。然而，目前牛初乳类产品国内外缺乏必要的检测方法，此种方法的建立为牛初乳类产品的工业化开发与检测提供一种准确、快速、稳定的检测手段。