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寡糖特异性麦芽糖酶产生菌的产酶条件优化

2011-09-26刘赛男,顾艳丽,张慧,李宪臻

大连工业大学学报 2011年4期

刘 赛 男, 顾 艳 丽, 张 慧, 李 宪 臻

(大连工业大学 生物工程学院, 辽宁 大连 116034)

0 引 言

麦芽糖是重要的淀粉糖品种,在人体代谢中不需胰岛素就能被吸收[1]。纯麦芽糖可用于糖尿病患者静脉输液,是糖尿病患者的营养剂和辅助治疗剂,所以高纯度的麦芽糖在医药上具有重要的价值[2]。目前的麦芽糖生产是将淀粉通过真菌淀粉酶和β-淀粉酶处理[3],产生由葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、四糖等麦芽低聚糖以及多糖组成的普通麦芽糖浆[4]。要得到高麦芽糖浆,还要再添加脱支酶和β-淀粉酶共同作用,或用葡萄糖淀粉酶等对普通麦芽糖浆进行后处理[5]。由于后处理所添加的酶都能水解麦芽糖,造成原料的浪费,并且难以获得高产率的纯麦芽糖[6-9]。

寡糖特异性麦芽糖酶可以作用于麦芽三糖、四糖等麦芽糖低聚糖生成葡萄糖和麦芽糖,从而提高麦芽糖的含量和纯度[10]。本研究以分离到的一株能够降解麦芽低聚糖的寡糖特异性麦芽糖酶产生菌M136为对象,并以实验室自制麦芽低聚糖作为酶解底物对菌种的产酶条件进行了优化。

1 材料与方法

1.1 微生物菌株

寡糖特异性麦芽糖酶生产菌M136,本实验室分离保存。

1.2 培养基

固体培养基:普通麦芽糖浆20 g/L,酵母浸粉1.0 g/L,琼脂20 g/L。

基础培养基:普通麦芽糖浆/麦芽低聚糖浆(实验室自制)20 g/L,酵母浸粉1.0 g/L。

1.3 酶活力分析方法

以自制麦芽低聚糖(500 g/L)作为酶解底物,将0.96 mL粗酶液与40 μL麦芽低聚糖混合后,在37 ℃水浴中反应1 h,用DNS法测定还原糖。

酶活力单位定义:每小时催化麦芽低聚糖降解生成1 mg还原糖所需的酶量为一个酶活力单位。……

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