常 凯， 王 红 英， 孙 井 辉， 钱 斯 日 古 楞

( 大连工业大学 生物工程学院， 辽宁 大连 116034 )

脂肪酶是目前用途最广泛的酶催化剂之一[1]。现在很多学者正在研究利用脂肪酶，把人类生活和工业生产产生的劣质油催化生成生物柴油[2]。这种新技术为解决能源危机、环境保护等世界性难题提供了新的途径。但由于游离的脂肪酶对温度和酸碱强度都有着严格的要求，储存困难，而且价格偏高、不易回收利用等特点，很大程度上限制了脂肪酶在人类环保产业等中的应用。壳聚糖是一种生物相容性好、易生物降解、无毒无副作用的天然高分子材料，其分子表面存在着丰富的羟基和氨基等官能团。近年来磁性高分子载体固定脲酶、糖化酶等的研究已有报道[3-4]，而采用磁性壳聚糖微球固定脂肪酶，还未见报道。用具有磁性的壳聚糖微球固定化脂肪酶，不仅能保持脂肪酶催化高效性和专一性，而且能提高脂肪酶的热稳定性和酸碱稳定性[5-7]，易于分离，有利于脂肪酶的重复性使用及产品的纯化，从而降低脂肪酶的使用成本。本文通过戊二醛与壳聚糖的氨基基团交联，对壳聚糖进行改性以增强了脂肪酶的结合力，从而提高脂肪酶的操作稳定性；同时对固定化条件和固定化酶性质等进行系统的研究。

1 材料与方法

1.1 材 料

脂肪酶，活力为6 733.58 U/g，Sigma公司；壳聚糖，分析纯，上海缘聚生物科技有限公司；聚乙烯醇，分析纯，天津市天河化学试剂厂；橄榄油，分析纯，上海化学试剂采购供应站；……