毛 玮 ， 侯 英 敏， 刘 志 文

( 大连工业大学 生物工程学院， 辽宁 大连 116034 )

0 引 言

油菜菌核病(Sclerotiniasclerotiorum)是由子囊菌亚门柔膜菌目核盘菌引起的一种真菌性病害，在油菜各个生育期和各部位均能为害，尤其以茎部受害最重。菌核病已成为一种世界性的病害，严重地影响了世界各国的油菜生产，在我国各油菜产区，特别是长江中下游产区，表现得尤为突出[1]。

关于油菜菌核病菌致病的生化机理，有研究表明核盘菌分泌的草酸毒素和纤维素酶等多种胞壁降解酶起着重要作用[2]，可以共同作用破坏植物细胞壁细胞。也有报道，草酸可诱导油菜体内PPO、POD活性的变化，这些酶活性的变化与油菜的抗病机制有密切的关系[3]。此外，几丁质酶在植物抗性中的作用也引起了学者们的注意[4]。

本实验采用草酸与核盘菌分别处理离体的油菜叶片，系统分析油菜叶片中PPO、POD、纤维素酶与几丁质酶活力的变化，探讨这些酶与油菜菌核病致病机理及抗病机制的关系，为进一步防治菌核病奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材 料

核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum)由华中农业大学油菜研究室提供；甘蓝型油菜华协一号由甘肃省种子推广总站提供，种植于温室的营养钵中。

1.2 方 法

1.2.1 采样与接种

将核盘菌菌核移入PDA平板培养基上，在26 ℃下进行活化培养，待琼脂平板上长满菌丝后用打孔器打成直径为0.5 cm的菌丝琼脂块，供接种用。

选6叶期生长健壮的油菜叶片进行离体处理，第1组为接入菌丝琼脂块，将离体叶片叶柄基部浸入盛有清水的平皿中，并用保湿棉保湿，用无菌镊子夹菌丝琼脂块，放在叶片中部，将有菌丝的一面紧贴叶片正面；……