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一种高效的巨噬细胞体外诱导培养方法

2011-09-17张春蕾华正宇袁小林李小欢

大连医科大学学报 2011年5期
关键词:肝癌小鼠实验

张春蕾,华正宇,袁小林,杨 真,张 青,李小欢

(1.大连大学附属中山医院中心实验室,辽宁大连 116001;2.大连医科大学附属第一医院病理科,辽宁大连 116011)

一种高效的巨噬细胞体外诱导培养方法

张春蕾1,华正宇2,袁小林1,杨 真1,张 青1,李小欢1

(1.大连大学附属中山医院中心实验室,辽宁大连 116001;2.大连医科大学附属第一医院病理科,辽宁大连 116011)

[目的]探索一种不需要分离前体细胞和加入外源性细胞因子的巨噬细胞体外诱导培养方法。[方法]收集腹腔接种肝癌腹水瘤细胞的小鼠腹水细胞,37℃、5%CO2条件下不换液、不传代体外培养。当培养细胞几乎全部死亡时,有少量细胞的胞浆内颗粒消失、折光性变强。此时少量换液,这些细胞的体积迅速增大、分裂增殖活跃。通过形态学观察、免疫学标志检查及体外吞噬功能检测,鉴定这些细胞是巨噬细胞。[结果]本实验获得了高纯度、高活性的巨噬细胞,具备巨噬细胞的形态特征和巨噬细胞特异的分化抗原-CD68。与不同诱导方法培养的巨噬细胞的吞噬能力比较,差异均有显著性意义(P<0.05),表明死亡细胞诱导的巨噬细胞具有良好的吞噬能力。[结论]应用不需要分离前体细胞和加入外源性细胞因子的巨噬细胞体外诱导培养方法,操作简便、经济实用,易于获得足量的巨噬细胞,可广泛应用于临床及实验研究。

死亡细胞;诱导;巨噬细胞;分化

巨噬细胞是机体免疫系统的重要细胞成分,在非特异性免疫防御及特异性免疫应答中均起十分关键的作用。……

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