安 静，陈会君

本研究根据慢性心肌炎及早期扩张型心肌病（DCM）患者之气阴两虚、瘀血阻滞、热毒残留的症候特点。观察益气养阴活血方对小鼠心肌组织病理形态学变化及心肌组织肿瘤坏死因子－α（TNF－α）的影响，初步揭示作用机制，为中医药早期治疗DCM提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 210只雄性Balb／c小鼠，体重10g，3周～4周龄，由北京军事医学科学院实验动物中心提供。分笼饲养，每笼10只室温（26±3）℃，均食用普通饲料。

1.2 病毒 柯萨奇B3m（CVB3m）病毒（Nancy株，购自哈尔滨医科大学克山病研究所），在Hela细胞中传代，冻融3次，离心（2 000r／min，10min），上清液分装，在 Hela细胞中测50%组织感染率（TCID50）为10－7，－70℃保存备用。

1.3 实验用药 益气养阴活血组方：黄芪、红参、生地、麦冬、五味子、川芎、丹参、兰根、大青叶、桔梗、升麻、远志、柏子仁、合欢皮。中药经水提取，制成浸膏，含水量为21%。用蒸馏水稀释，调整浓度为82%，即相当于每毫升悬液中含生药4.3g备用。黑龙江中医药大学制剂室提供。生产日期：20051108。

1.4 主要试剂 试剂盒TrizolRNAIsolation、反转录试剂盒由美国Invitrogen公司提供、TaqDNA聚合酶由大连宝生物有限公司提供。PCR Marker试剂盒由美国Promega公司提供。PCR引物，应用引物设计软件Primer5.0设计引物，上海捷倍思基因有限公司合成。详见表1。

表1 PCR引物序列

1.5 模型制备及分组 3周～4周龄雄性Balb／c小鼠共210只，自然光线，自由饮水，自由摄食条件下适应性喂养1周。1周后，其中180只Balb／c小鼠随机分为4组：正常对照组、模型组，中药高、低剂量组。正常对照组30只，模型组，中药高、低剂量组各60只。中药高剂量组、中药低剂量组、模型对照组均于实验的1d、8d、15d、22d、36d、50d分别予腹腔……