庞春红 李澎涛 朱晓磊

(1中日友好医院病理科，北京市朝阳区樱花东路2号，100029;2北京中医药大学;3世界中医药学会联合会)

通过对缺血－再灌注损伤血清TNF－α、血清P－selectin、血清sICAM－1含量的测定及对脑组织ICAM－1的免疫组化定位分析，探讨在脑缺血－再灌注所致炎症级联反应损伤过程中TNF－α对其他细胞因子所发挥的调节作用，以及清开灵的作用特征。

1 材料与方法

1.1 实验动物与分组 健康雄性Wistar大鼠，体重(200±20)g(维通利华公司实验动物中心提供)。动物随机分为9组，每组12只，9组为正常对照组、缺血再灌注24h模型组(模型24h组)、缺血再灌注72h模型组(模型72h组)、缺血再灌注24h TNF－α抗体组(抗体24h组)、缺血再灌注72h TNF－α抗体组(抗体72h组)、缺血再灌注24h清开灵给药组(清开灵24h组)、缺血再灌注72h清开灵给药组(清开灵72h组)、缺血再灌注24h TNF－α抗体与清开灵共用组(抗体加清开灵24h组)、缺血再灌注72h TNF－α抗体与清开灵共用组(抗体加清开灵72h组)。

1.2 动物模型制备 按照许沛虎［1］的方法，加以改良，经腹腔注射10%水合氯醛(按0.35mL/100g体重)麻醉，颈前术区脱毛、消毒。颈部正中切口长约3cm，逐层分离，暴露并分离双侧颈总动脉。注意勿损伤迷走神经。在双侧颈总动脉下各置一段5cm长的丝线，用血管钳钳夹丝线两端使两动脉同时夹闭，30min后同时松开丝线，使血液重新灌流，术区局部使用青霉素粉少许，逐层缝合切口。应用TNF－α抗体的各组，在松开丝线恢复再灌流的同时经大鼠舌下静脉注射TNF－α单克隆抗体溶液(用生理盐水稀释，10μg/100g体重)［2－3］。清开灵给药组分别于造模前1h、造模后4h及以后每12h按照0.3mL/100g体重腹腔注射清开灵注射液。……