束缚加悬吊应激大鼠脑组织单胺类神经递质的变化及异丙酚对其的影响
2011-09-12李晓梅杨成君陆艳娟吉林大学白求恩医学院生物化学与分子生物学实验中心吉林长春130021
李晓梅 杨成君 陆艳娟 (吉林大学白求恩医学院生物化学与分子生物学实验中心,吉林 长春 130021)
单胺类神经递质在应激状态下其含量异常〔1~4〕,目前尚未有关于麻醉剂异丙酚对应激大鼠不同脑区单胺类神经递含量变化的报道。本研究旨在观察异丙酚对束缚加悬吊应激大鼠脑组织不同脑区单胺类神经递质含量的影响。
1 材料与方法
1.1 动物与分组 雄性SD大鼠30只,体重(250±10)g,吉林大学实验动物中心提供。正常饮食,昼夜饲养48 h。于实验前12~24 h禁食,不限水;实验分组,雄性SD大鼠30只随机为:应激对照组(S组),将大鼠四肢用绷带分别固定于鼠板上,头朝下尾朝上悬挂,经股静脉注射5 ml生理盐水,在1 h内注射完毕;麻醉剂异丙酚组,分别在1 h内经股静脉注入用5 ml生理盐水稀释的异丙酚5 mg/kg(p1组)和10 mg/kg(p2组)束缚加悬吊时间为 6 h〔5〕。
1.2 实验试剂与仪器 注射用异丙酚,西安力邦制药有限公司;5-羟色胺(5-HT),硫酸肌肝,去甲肾上腺素(NE),多巴胺(DA)(美国SIGMA公司);邻苯二甲醛(分析纯上海化学试剂公司),L-半胱氨酸(上海康达公司)。荧光分光光度计 RF-5301PC(日本岛津公司),电热三用水箱DS-1型(北京医用仪器厂),冷冻离心机TGL-16G型(上海分析仪器厂)。
1.3 单胺类神经递质测定与取材 各组动物实验结束后,处死迅速取脑组织分出不同脑区-80℃保存,用时取出,称重于冰冷酸性正丁醇中制成匀浆,离心分离水相及有机相。5-HT在碱性条件下与邻苯二甲醛缩合,形成具有荧光的化合物,NE、DA与氧化剂反应成具有荧光的化合物,上述荧光化合物强度与浓度成直线关系,即可测定其荧光强度〔6〕。……
