张慕淳，张赟，王金辉，王永刚，高吉，马天武，温建平，孔祥波

（吉林大学中日联谊医院泌尿外科，长春 130033）

肾细胞癌（renal cell carcinoma，RCC）是一种泌尿外科常见的恶性肿瘤，占成人恶性肿瘤的3%，男女比例为2∶1。RCC以肾小管为中心旋转生长，且组织内新生血管丰富，血管间多形成动静脉瘘［1］。尽管肿瘤的大小、分级、核的非典型性等因素都与患者预后相关，但是目前RCC的生物学行为还难以预测。本研究旨在研究RCC中微血管的发生和侵入与肿瘤分期及发生复发转移的关系，并评价肿瘤的恶性程度及患者预后情况，为术后的靶向治疗或其他辅助治疗提供依据。

1 材料与方法

1.1 组织标本

临床资料RCC组织标本88例。临床病理分期T111例，T252例，T3a18例，T3b7例；术后发生转移17例；患者年龄38～82岁。标本切片厚4 μm，用二甲苯和乙醇去掉石蜡，水化并在柠檬酸缓冲液中孵化使抗原恢复活性，在微波中干燥，备免疫组化染色用。

1.2 主要试剂

鼠抗人CD34单克隆抗体和兔抗人CD34单克隆抗体、Ⅷ因子相关抗原（丹麦DAKO公司生产）。

1.3 方法

染色过程使用DAKO公司生产的检测试剂盒。为了对血管的发生进行定量分析，首先在低倍镜下（×100）观察，分别标记肿瘤微血管数量最丰富的区域，然后随机选择3个区域，在高倍镜下（×400）计数微血管数量，并计算血管的平均数。为了观察微血管的入侵，在高倍镜下检查肿瘤的周边，对明确入侵的血管计数。当一组肿瘤细胞被由Ⅷ因子相关抗原或CD34明确染色的内皮细胞包围时，认为存在血管入侵［2～4］，以评估微血管的发生与侵入与临床病理分期之间的关系。……