宋希双，杨德勇，汪淑晶，车翔宇，王建伯，叶林，王丽娜

（1.大连医科大学附属第一医院泌尿外科，辽宁 大连 116011；2.大连医科大学生物化学教研室，辽宁 大连 116011；3.复旦大学附属肿瘤医院泌尿外科，上海 200032）

膀胱癌是泌尿系统最为常见的恶性肿瘤，手术治疗后肿瘤容易复发。RNA干扰能够特异性下调膀胱癌细胞内高表达的癌基因，为膀胱癌的基因治疗提供有力的手段，具有十分重要的临床应用价值［1］。然而如何将治疗性基因片段在患者体内安全高效、特异的导入肿瘤细胞是亟待解决的问题［2］。病毒载体虽然可以较好的完成这一任务，但其与人基因组整合后出现的致瘤性大大增加了基因治疗的危险性，限制了其临床应用［3］。寻找更加有效的基因转染方法成为许多基因治疗的关键。

超声辐照超声微泡（microbubble destruction with ultrasound）是一种相对安全、高效的基因转染方法，超声波辐照超声微泡破裂后对细胞产生的空化效应可以使细胞膜的通透性可逆性增加，促进基因向细胞内转染，具有安全、高效、靶向性强的特点，是一种十分有前途的体内基因转染方法［4］。在本实验中，我们使用超声微泡的方法向T24细胞中转染荧光标记的siRNA小片段，并通过MTT实验和流式细胞仪评估其安全性和转染效率，为寻找安全、特异、高效的体内转染方法提供体外实验基础。

1 材料与方法

1.1 细胞株及培养

人膀胱癌细胞系T24购自中国科学院上海生命科学院细胞资源中心。培养于含10%小牛血清，100 U/mL青霉素及100 U/mL链霉素组成的RPMI 1640培养基中，37℃、5%CO2、、95%湿度的孵箱内。……