王晓晔，左海亮，崔华雷

(天津市儿童医院，天津 300074)

表皮细胞的损伤是皮肤损伤的起始和病理生理基础。关于表皮细胞移植治疗深度烧伤，文献报道各有不同，对表皮细胞的移植密度尚无明确定论。2009年1～7月，我们进行了不同密度原代自体表皮细胞的移植，观察治疗烧伤的效果，探讨最佳的表皮细胞移植密度。

1 材料与方法

1.1 实验动物与分组 选取健康Wistar大鼠60只，雌雄各半，体质量(130±10)g。随机分为A组(移植密度6.0×104/cm2)、B组(移植密度 1.2×105/cm2)、C组(移植密度2.4×105/cm2)和 D 组(对照组)，每组15只。

1.2 烧伤模型的制作 大鼠术前禁食6 h，腹部皮肤消毒后，予10%水合氯醛(0.3 ml/100 g)腹腔注射麻醉。麻醉满意后，剔除背部鼠毛，形成约2 cm×2 cm无毛区，用胶带粘贴四周。将大鼠侧放悬空，无毛区暴露充分。用95℃热水，直接倾倒于无毛区，时间约40 s，造成Ⅲ度烧伤模型(病理检查确定烧伤程度)。伤后10 min，生理盐水10 ml腹腔注射。单笼饲养，每日予氨苄青霉素4万U肌注。每日伤口清洁消毒。

1.3 自体表皮细胞制备 烧伤模型制作后第3天，在同一只大鼠腹部皮肤消毒后，予10%水合氯醛(0.3 ml/100 g)腹腔注射麻醉。麻醉满意后，于其大鼠背部(与烧伤区域不同)消毒剃毛后分别选择0.8 cm ×0.5 cm 小块面积取皮，共约 2 cm2，皮肤缺损部位用缝皮针线缝合。获取的皮肤在0.25%胰蛋白酶和0.04%EDTA中消化16 h下消化，消化方法为冷消化法和真皮刮除法，0.4%台盼蓝染色活细胞计数。制备成密度为1×106个/ml表皮细胞悬液备用。

1.4 移植密度和方法 于烧伤后第4天切痂，用移液器调整好所需要的剂量分别移植，液量不足240 μl的用培养液补足。

1.5 指标观察 移植后的创面是否发生感染，发生感染的例数，各组创面情况、愈合情况、创面伤口的收缩比例等。……