朱永香,王 倩,贾 敏,王 爽 ,杨 颖,于 玮,曹 健 ,南 瑛

神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)是由36个氨基酸残基组成的单链多肽,属于胰多肽家族,广泛分布于大脑皮层、纹状体腹侧及背侧以及多个边缘结构包括下丘脑(hypothalamus)和杏仁核(amygdala)[1],是最重要的调节进食的神经肽,具有较强的促食欲作用,NPY的Y1与Y 5受体参与调节NPY对食欲的刺激作用[2]。有研究显示,大鼠摄入含有蔗糖的饲料后脑干的NPY mRNA明显增多[3],说明NPY可能参与了甜味觉信息的评估过程。杏仁中央核是参与味觉信息评估的重要核团,该核团内含有丰富的NPY[1],也含有中等量NPY的Y1受体[4]。由此推测NPY可能参与了杏仁中央核对味觉信息的评估机制,从而调控摄食行为。关于NPY在杏仁中央核是否参与味觉调控的相关报道很少见。为此,本研究采用免疫组织化学方法观察了蔗糖甜味觉刺激对大鼠杏仁中央核内NPY及FOS表达的影响,为进一步探索NPY在中枢神经系统内的促食欲作用及其与肥胖的关系提供形态学依据。

1 材料和方法

1.1 材料 成年健康SD大鼠16只,雄性,体质量 220 g～250 g,自由摄食、饮水,动物房温度维持在(20±3)℃,光暗周期为12 h︰12 h,实验前在上述条件下喂养 2 d。多克隆兔抗大鼠NPY抗体,购自北京博奥森生物技术有限公司,多克隆兔抗大鼠c-FOS抗体(Sc-52)购自美国Santa Cruz公司,SP试剂盒(羊抗兔)及DAB浓缩型试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司。主要仪器有显微镜(O lympus,BX51)、照相机(Spot Insight,U 3.5)、图像分析软件(Image-Pro Plus 6.0)。

1.2 方法

1.2.1 动物模型及分组 将动物随机分为 2组,每组8只,分别为对照组和实验组。将大鼠禁水20 h后,在 09:30时给予对照组大鼠15 m L蒸馏水,给予实验组大鼠15 m L蔗糖溶液(1 mol/L),30m in后,为了避免大鼠脱水,给对照组及实验组大鼠饮60m in的自来水,连续训练4 d。……