刘海波，孔垂泽

（中国医科大学附属第一医院泌尿外科，沈阳 110001）

许多研究表明，p53蛋白表达是膀胱癌发生发展中的重要因子，p53行使其生物学效应主要通过p53蛋白与特异基因序列结合后，激活下游基因的表达来实现［1］。PIG3为p53诱导基因3（p53 inducible gene 3），是p53的下游基因之一，其基因全长7424 bp，定位于2p23.3，编码分子量约35kD的蛋白质，其在膀胱癌发生发展中的作用目前尚不明确。本研究检测40例膀胱癌标本及15例非肿瘤膀胱组织中PIG3蛋白表达情况，探讨其在膀胱癌发生发展中的作用。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选择中国医科大学附属第一医院泌尿外科患膀胱癌而行膀胱全切或部分切除术的标本40例，及距肿瘤≥3 cm的膀胱组织标本15例为实验对象。所有标本均得到患者授权。病例组40人，年龄42～87岁，平均年龄59岁，其中临床分期T118例，T213例，T39例；术后病理分级G119例，G215例，G36例；复发性膀胱癌7例。对照组15例，年龄54～85岁，平均年龄63岁。手术切取的膀胱标本立即于无菌条件下放入消毒后的Eppendof管内，于液氮中30 min后放入-70℃深低温冰箱冻存备用。

1.2 主要药品、试剂及仪器

药品及试剂：鼠抗人PIG3单克隆抗体购自美国Oncogene公司；鼠抗人β-actin单克隆抗体购自武汉博士德生物工程有限公司；碱性磷酸酶标记的羊抗鼠IgG购自美国Sigma公司；丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺购自瑞典Pharmacia公司；硝酸纤维素膜购自美国Bio-rad公司。

实验仪器：2K15C型低温超速离心机为美国Sigma公司产品；Chemi Imager 5500电泳凝胶成像系统为美国Alpha公司产品；VC50T型超声粉碎仪为美国Sonics&Materials公司产品；DIAX900型匀浆机为德国Heidolph公司产品；MultiphorⅡ型电泳仪为瑞典Pharmacia Biotech公司产品；……