田 琦,吕胜军

(1.吉林省肿瘤医院 放疗科,吉林 长春 130012;2.吉林省肝胆病医院 电诊科,吉林 长春 130062）

Survivin是目前发现的最强细胞凋亡抑制因子,其主要的生物学功能是抑制凋亡,参与细胞周期的调控以及参与血管的生成[1-3]。Ki-67是一种非组蛋白核抗原,参与细胞有丝分裂,检测Ki-67表达,反映肿瘤细胞的增殖状态。本研究采用免疫组化S-P法,在蛋白水平检测Survivin、Ki-67的表达,旨在探讨二者与宫颈癌发生、发展的相关性。

1 材料与方法

1.1 材料来源

选择2009年5月-2010年8月吉林省肿瘤医院病理科存档的手术切除宫颈鳞癌26例,患者年龄28-71岁,平均年龄46岁,术前未接受过其它治疗,另外收集活检或手术切除的宫颈上皮内瘤变(CIN）标本78例,其中CINⅠ28例,CINⅡ23例,CINⅢ27例,患者年龄23-75岁,平均年龄41岁,因子宫急性病变行子宫切除手术的正常宫颈12例作为对照。

1.2 主要试剂

Survivin兔抗人多克隆抗体购自福州迈新生物技术有限公司,Ki-67为ZM-0166单抗,工作液,由北京中杉金桥生物技术有限公司提供。

1.3 方法

所有标本经10%福尔马林固定,常规石蜡包埋后连续切片,每例标本行HE染色及S-P免疫组化染色,光镜下观察。免疫组化步骤按照S-P试剂盒说明书进行,一抗浓度为1∶100,由福州迈新技术有限公司及北京中杉金桥技术有限公司提供的阳性对照片作阳性对照,以PBS代替一抗作为阴性对照。

Survivin阳性表达判定标准:Survivin阳性表达定位于细胞浆,偶见于细胞核,细胞浆或细胞核呈现淡黄色、棕黄色或棕褐色颗粒为阳性,随机观察5个高倍镜下视野,阳性细胞≤5%为0分,6-25%为1分,26-50%为……