金 宏,温 娜,纪鹏艳,王 爽,王树东,齐 玲*

(1.吉林医药学院实验中心,吉林吉林市 132013;2.吉林大学第一医院心血管中心）

脑肿瘤发病率目前在全球范围内呈上升趋势,脑肿瘤中以胶质瘤最为常见,恶性胶质瘤是肿瘤患者的第4位死亡原因,具有发病率、复发率、死亡率高和治愈率低“三高一低”的特点。研究表明,五味子具有保肝、抗肿瘤、抗氧化与抗衰老等作用,但目前对于五味子的研究都主要集中在保肝作用方面,五味子在脑肿瘤中治疗作用少有研究。本研究观察了五味子乙素(Schisandrin B,Sch B）对体外培养脑胶质瘤SHG-44细胞生长的作用,旨在探讨五味子乙素在脑肿瘤细胞生长中起到的作用。

1 材料与方法

1.1 细胞株脑胶质瘤SHG-44细胞由吉林大学提供。

1.2 主要试剂细胞培养基RPMI-1640(Thermo）,小牛血清(Gibco）,五味子乙素(中国药品生物制品检定所）,胰蛋白酶(Gibco）,四甲基偶氮唑(MTT）(Sigma）,二甲基亚砜(DMSO）(Thermo）。

1.3 脑胶质瘤 SHG-44细胞的培养从液氮中取出冻存的脑胶质瘤SHG-44细胞,迅速放入37℃水浴箱中复苏,然后将细胞接种于培养瓶中,加入10 ml含10%小牛血清的RPMI-1640细胞培养液,将其置入37℃、5%CO2细胞培养箱中培养,隔日换液。

1.4 药物作用后 SHG-44细胞生长情况检测将五味子乙素用85%乙醇溶解后,取适量药液加入含5%小牛血清RPMI-1640细胞培养液,配制成终浓度为 0,50,100,200 μ l◦ml-1的药物。取对数生长期的脑胶质瘤SHG-44细胞,用胰酶消化后,用含5%小牛血清RPMI-1640细胞培养液调整细胞浓度为1×106ml-1。将细胞悬液均匀接种于96孔板中,每孔100 μ l,置入 37 ℃、5%CO2细胞培养箱中培养 24 h,使细胞同步化。分别于24、48、72 h弃去上清液,加入含不同浓度的五味子乙素,每个药物浓度重复5次。……