弥漫性脑创伤后Bcl-2家族与线粒体途径细胞凋亡的相关性分析
2011-08-20王金林尹立国
王金林,尹立国,李 军
(1.唐山市工人医院,河北唐山 063000;2.遵化市人民医院;3.玉田县第二医院)
随着凋亡机制的深入研究,线粒体在细胞凋亡过程中的中心地位逐渐得到确认,线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)由于其在线粒体和细胞存活和死亡中的重要作用而备受广大学者关注。近年来的研究显示,bcl-2家族与线粒体膜通透性转换孔关系密切。Bcl-2和Bax是Bcl-2家族中最主要的两个成员,分别具有抑制和促进细胞凋亡的作用,本研究以Marmarou方法建立大鼠弥漫性脑创伤模型,试图通过相关性分析进一步说明其在线粒体途径细胞凋亡中的作用。
1 材料与方法
1.1 脑创伤模型的制备与分组雄性成年SD大鼠90只,体重300-350 g,随机分为实验对照组、颅脑创伤组 。每组设伤后 1 h 、3 h、6 h、24 h 、48 h、72 h 6个时相点。对照组每个时相点3只大鼠,创伤组每时相点6只大鼠。各组未达到规定时相点死亡的大鼠从实验中剔除。动物置乙醚麻醉缸中,以乙醚吸入方式深度麻醉动物,麻醉后的大鼠俯卧于落体致伤海绵垫上,70%酒精消毒颅顶部皮肤,沿正中线矢状切开头皮,剥离骨膜,显露人字缝与冠状缝,将一不锈钢垫固定在大鼠冠状缝与人字缝之间将大鼠头部固定于打击模型架下的头部固定装置中,使重450 g,直径18 mm的铜柱沿垂直玻璃管于1.2 m高度自由落下,撞击大鼠颅骨顶部的钢垫,造成大鼠中度弥漫性颅脑损伤。撞击后即刻移开大鼠,以免铜柱反弹造成头部二次打击伤,给予颅脑损伤后大鼠,头皮切口常规消毒、缝合。对照组仅给予相同的麻醉处理及沿中线矢状切开头皮、剥离骨膜、在冠状缝与人字缝之间粘钢垫,置致伤海绵垫上,但不行自由落体致伤,而后常规消毒、缝合切口.各组未到规定时相死亡的大鼠予以剔除。……
