郑燕璇 王晓鸿 曹婉维 李孜孜 李巍

皮肤疾病中变态反应在其病因发病机制中占很大比重，因此在皮肤活检标本诊断中显示抗原或抗体是很重要的，一般使用冰冻切片直接免疫荧光法观察切片标本上荧光抗体染色结果作为抗原的鉴定和定位。皮肤活检标本冰冻切片行直接免疫荧光法要求切片质量优良，制作一张优质的冰冻切片，制片过程中的每一个环节都很重要，其中包括对包埋剂的选择应用。包埋剂经冷冻后(-20℃ ～-25℃)对皮肤组织可起到支托固定的作用，现大部分医院病理科在制作冰冻切片时常用的包埋剂是OCT，中山大学附属第五医院病理科在多年临床工作中使用普通胶水替代OCT包埋组织(包括皮肤活检标本、肾脏活检标本、手术切除标本等)，所制冰冻切片用于直接免疫荧光检查与使用OCT包埋剂所制冰冻切片用于直接免疫荧光检查效果相同，现介绍如下。

1 资料与方法

1.1 一般材料 皮肤活检标本;普通胶水(用清洁干净的OCT空瓶装载);组织固着器;载玻片;荧光抗体(兔抗人IgA、兔抗人IgG、兔抗人IgM、兔抗人C3)抗体均为丹麦DAKO公司产品;PBS;缓冲甘油等。

1.2 方法 将皮肤活检组织取材后放置在待用的组织固着器正中位置上，用普通胶水替代OCT将组织块完全包埋。在-20℃～-25℃温度中固着器上的组织被包埋剂包裹迅速凝冻固定，将固着器放置到冰冻切片机的冷冻头上(冷冻头设定温度为-15℃左右)。开始修切冷冻头上的组织至组织完全暴露时留片，切片要求尽量薄切，以利于抗原抗体接触和镜检［1］。……