邓紫玉 孙鹥 林俊 万颖 屈晓雯 赵芳

骨关节炎(osteoarthritis，OA)是中老年人最常见的骨关节疾病，其最早出现的改变是关节软骨的损伤。软骨破坏的病理表现是软骨外基质(extracellular matrix，ECM)的降解，而聚蛋白多糖的丢失是这一过程的主要病理表现之一［1］。正常、退行性变的关节软骨在代谢转化过程中释放的代谢产物进入血液和关节液中，聚蛋白多糖酶(ADAMTSs)就是这样一种相对特异的软骨代谢标志物。本研究通过检测血液和关节液中的ADAMTSs，以探讨其与OA的相关关系及在OA早期诊断中的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 为2008年11月至2011年3月云南省第一人民医院住院及门诊膝骨关节炎患者。其中男36例，女51例，23～81岁，平均45.8岁，均符合美国风湿病学分会1987的骨关节炎诊断标准。30例健康体检者为正常对照组。

1.2 排除标准［2］①有炎症、创伤及手术史，肿瘤、糖尿病等疾病的患者。②诊断或疑似为类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的患者。③检查前两周内使用过糖皮质激素、非甾体抗炎药的患者。④妊娠、哺乳期间的妇女。⑤有感染性关节炎、其他反应性关节炎等关节疾病的患者。

1.3 主要试剂 采用德国的Invitek GmbH公司提供的聚蛋白多糖酶活性测定试剂盒。

1.4 实验方法 抽取患者关节液和血清，冻存于-70℃。样品在检测前恢复至室温，严格按照说明书进行操作。样本首先用底物孵育。底物被水解15 min，反应成2个多肽片段，伴有N基末端ARGSVIL多肽通过双抗体夹心酶联反应定量测定。首先在酶标板预包被抗新表位ARGSVIL抗体，加入蛋白水解反应混合物孵育，然后加入抗聚蛋白多糖二抗，最后加入辣根过氧化酶后无色的显色剂转变成黄色，在450 nm 处检测光密度值，通过标准曲线算出样品中聚蛋白多糖聚合酶活性。……