胡乐琴，汪 卿，柳俊秀，何培民

（上海海洋大学水产与生命学院，上海 浦东 201306）

腹泻性贝毒素是多醚类赤潮藻毒素，其成分主要有软海绵酸（okadaic acid，OA）、鳍藻毒素（dinophysis toxins，DTX）。OA是蛋白磷酸酶PP1（Protein Phosphatase）和 PP2A（ser／thre Protein Phosphatase 2A）的特异性抑制剂，通过特异性地作用于蛋白磷酸酶PP1和PP2A抑制酶的去磷酸化，引起信号传导途径的变化，造成机体中毒［1］。OA还是肿瘤促进因子，可引致DNA加合物形成［2］。对水体和贝类产品进行毒素快速检测是预防藻毒危害的有效方法。

免疫学检测技术利用抗原与抗体专一、特异性结合的特点对样品进行检测，是一种高度灵敏高度特异的检测方法。1964年Johnson等首次成功制备了抗STX的多克隆抗体，后Adachi M等人［3］进入了藻毒素的单抗研究。目前市场上已经有几种藻毒素的免疫检测试剂盒和试纸条，用于藻毒素的快速检测。

关于大田软海绵酸单克隆抗体的制备在国内已有报道［4］，但尚未见到多克隆抗体的研究。有关大田软海绵酸多克隆抗体的制备与检测报告如下。

1 材料与方法

1.1 试验材料 试验动物：雄性新西兰白兔，体重为2～2.5kg，购自中国科学院上海生物研究所抗体中心。大田软海绵酸（OA）标准品购自北京伊普瑞斯科技有限公司。用甲醇稀释成100ng／μL贮存于-20℃冰箱备用；牛血清白蛋白（BSA）、卵清蛋白（OVA），N-羟丁二酰亚胺（N-hydroxysuccinimide）、N，N双环乙烷碳二亚胺（N，N-dicyclohexylcarbodiimide，DCC）、N，N-二甲基甲酰胺（N，N-dimethy-formamide，DMF）、福氏完全佐剂、福氏不完全佐剂、邻苯二胺（OPD）等为Sigma公司产品；辣根过氧化物酶标记羊抗兔Ig-HRP和底物TMB-H2O2购于上海生工生物工程技术服务有限公司，GelDoc凝胶成像仪购自Bio-Rad，NC膜购自Sigma公司，TTBS购自Invitrogen-Dynal。……