康润敏，陈晓晖，曾 凯，徐昌文，周英顺

（1.四川省畜牧科学研究院，四川 成都610066；2.四川大学动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室，四川 成都610064）

长途运输作为一种应激原常常会导致运送的猪只发生死亡和发病，Van der Meulen［1］等（2001）证明长途运输的应激能够降低肠道内pH值，使肠道的渗透性增加，运输结束后肠道的渗透性达到最高峰。渗透性的增加导致肠道内的细菌和内毒素从肠道迁移至全身血液循环中，这可能能够解释运输后疾病增加的原因［2－3］。2010年9月下旬，因猪场搬迁某集约化养猪场将猪只进行长途运输，猪场搬迁后20日间陆续出现11头种猪急性死亡。本次试验通过对急性死亡种猪临床症状观察，并采集急性死亡猪的病料，对可疑引起猪死亡临床症状和病理解剖变化的病原进行实验室诊断，并且进行细菌分离，然后检测分离出的细菌对18种常见药物的敏感性试验，为临床治疗提供依据。

1 材料

1.1 病料的采集 无菌采集急性死亡种猪的心、肝、脾、肺、肾、腹股沟淋巴结、脑等病料组织。

1.2 试剂 Trizol试剂、反转录试剂盒，购自上海英骏生物技术有限公司；TaqDNA聚合酶、dNTPs、DNAMarkerDL－2000，购自上海生工生物工程技术服务有限公司；药敏试纸，购自广州市迪景微生物科技有限公司；小鼠，购自四川大学华西医学院实验动物中心。

1.3 引物 猪瘟病毒引物是根据报道的中国C株E2区基因设计合成一对猪瘟病毒（Classical swine fever virus）特异性的PCR引物，片度跨幅A/D抗原区，扩增片段为375bp；猪日本乙型脑炎病毒引物根据GenBank报道的猪日本乙型脑炎病毒E基因序列并参考文献［4］设计，扩增片段为349bp；……