赵长光，宋松林，赵继勋，张国中

（1.中国农业大学动物医学院，北京 海淀100193；2.中牧实业股份有限公司，北京 丰台100070）

新城疫（newcastle disease，ND）是由新城疫病毒（newcastle disease virus，NDV）引起禽类的一种急性、高度接触性传染病，也是目前严重危害我国养禽业的主要疫病之一。虽然NDV只有一个血清型，但不同毒株之间的毒力存在明显差异。有关NDV毒力及其相关决定因素的研究一直是世界范围内的研究热点，其中反向遗传学操作技术是进行NDV毒力相关基因研究的一种主要技术手段。本文简要综述了NDV反向遗传操作系统的构建过程以及利用该技术在NDV研究中取得的最新成果。

1 反向遗传操作技术

反向遗传学（reverse genetics）是相对经典遗传学而言的。经典遗传学是从生物的表型、性状到遗传物质来研究生命的发生与发展规律，而反向遗传学则是直接从生物遗传物质入手，通过对遗传物质进行加工和修饰来研究基因突变后产生的生物体的特性，从而确定生物体基因组的结构与功能以及这些突变可能对生物体特性的影响。与之相关的各种研究技术统称为反向遗传学技术（reverse genetics manipulation technique）。

负链RNA病毒的反向遗传学技术［1］是将病毒基因组RNA逆转录成cDNA，在DNA分子水平上对RNA病毒进行加工、修饰，由病毒基因组cDNA和各种辅助蛋白来组装新的RNA病毒，从而研究病毒基因组的结构和功能，病毒的转录、表达机制和致病机理等的一项研究技术，也叫全长感染性cDNA克隆技术，又称“病毒拯救”。

2 NDV反向遗传学技术

NDV是单股、负链、不分节段的RNA病毒，基因组大小约为15.2kb，由3′－NP－P－M－F－HN－L－5′等6个主要基因组成。……