李晓蕾，张 宇，刘本军，高 利

（东北农业大学动物医学学院，黑龙江 哈尔滨 150030）

奶牛乳腺炎作为危害养牛业的一大疾病，临床诊断和防治一直是研究的重点，特别是临床诊断方面的研究一直是研究的热点。有关IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等因子与炎症的关系目前比较明朗，但他们的变化及变化趋势与不同程度乳腺炎的发展趋势是否存在相关性还不确定，基于此，本试验通过体细胞分类确定不同程度乳腺炎，同时测定这些病例血清中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的变化，探讨奶牛乳腺炎的发病程度及变化是否与上述4种细胞因子含量及变化存在一定关系，为今后诊断奶牛乳腺炎提供一种参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 IL-1β放免试剂盒，IL-6放免试剂盒，IL-8放免试剂盒，TNF-α放免试剂盒，体细胞计数仪，电冰箱，高速离心机，全自动γ免疫计数器。

1.2 试验动物及分组 阿城区某奶牛场，本试验选取年龄在4～8岁，2～5胎的经产奶牛，要求奶牛处于泌乳盛期或中期，即产后2～7个月。通过现场临床检查和CMT的检测及体细胞计数仪的检测进行分组。其中10头检测为阴性的奶牛编为C组，乳汁体细胞检查在0～50万个／mL；10头检测为轻度隐性乳腺炎奶牛编为Ⅰ组，乳汁体细胞检查在50万～150万个／mL；10头检测为重度隐性乳腺炎奶牛编为Ⅱ组，乳汁体细胞检查在150万～500万个／mL；10头检测为临床型乳腺炎的奶牛编为 Ⅲ 组，乳汁体细胞检查在500万个／mL以上。

1.3 方法

1.3.1 血样采集、血清制备 颈静脉采集血样C组、Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组各10头奶牛的血液，采样前消毒取血部位，对每头牛约取15mL的血液。自然凝固1～2h，冰浴30min，然后3000r／min离心10 min，分离血清，4℃保存，待测。……