肝苏对CCl4肝纤维化大鼠氧化应激和胶原表达的影响*
2011-08-06颖宗蕾沈镭王燕徐铭益刘梅窦爱霞陆伦根
曲 颖宗 蕾沈 镭王 燕徐铭益刘 梅窦爱霞陆伦根#
上海交通大学附属第一人民医院消化内科1(200080)
上海交通大学医学院附属仁济医院消化内科 上海市消化疾病研究所2
肝苏是中药扯根菜的成方制剂,具有清热利湿、解毒活血、平肝健脾等作用,对黄疸性肝病、慢性病毒性肝炎等慢性肝病有一定治疗作用[1,2]。本课题组的前期研究[3]发现肝苏可促进人肝细胞增殖,保护肝细胞和肝星状细胞(HSC)免受氧化应激损伤,且可抑制HSC分泌透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、转化生长因子-β1(TGF-β1),提示其具有肝细胞保护、抗氧化、抗肝纤维化作用。本研究以四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化模型,旨在观察肝苏对实验性大鼠肝纤维化的防治作用并进一步探讨其中的机制,为肝苏临床应用于抗肝纤维化提供理论和实验依据。
材料与方法
一、实验动物、主要试剂和仪器
健康雄性SPF级Sprague-Dawley(SD)大鼠 63只,体质量约220 g,购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司,饲养于上海交通大学医学院实验动物科学部。所有动物自由进食、饮水,温度、湿度符合标准,明暗12 h/12 h循环。
肝苏无糖型颗粒(四川古蔺肝苏药业有限公司),3 g/袋,相当于16.7 g生药,分别以蒸馏水配制成浓 度为 0.1 g/ml、0.2 g/ml、0.4 g/ml 的 溶液 。ALT试剂盒购自上海罗氏制药有限公司,AST试剂盒购自上海北加生化试剂有限公司,ALP试剂盒购自上海科华生物工程股份有限公司,血清HA检测试剂盒购自Gentaur公司,丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所。大鼠α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)抗体、Ⅰ型胶原抗体、Ⅲ型胶原抗体购自Abcam公司,免疫组化二抗和DAB试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司。……
