舒 蕾，任玉鹏，万 莉，马 磊，张 琦，谢志勇，杨 映，颜其贵,2*

（1.四川农业大学动物医学院，四川 雅安 625014；2.四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室，四川 雅安 625014）

1 发病情况和临床症状

四川资阳某规模化猪场采取自繁自养模式，发展生猪养殖。现存栏母猪500余头，2011年4月开始发病，全场妊娠母猪、泌乳母猪、育肥猪及小猪均发生腹泻，其中尤以产房哺乳仔猪最为严重。仔猪发病率为90%，发病1周左右死亡较多，也有出生后整窝死亡，该场发病1个月以来死亡上千头，死亡率高达65%。临床症状主要为2日龄仔猪呕吐、喷射状水样腹泻、粪便含未消化凝乳片状物，4～5日龄精神委顿、严重脱水、排黄色稀便，四肢乏力，发病1周左右仔猪死亡，给猪场造成的经济损失巨大。该场发生疫情后使用氟苯尼考、阿莫西林、泰乐菌素、甲氧嘧啶和头孢噻呋钠等药物对患猪进行治疗，均无效果。

2 剖检病变

剖检4头病死仔猪，病死仔猪尸体脏、臭，消瘦，腹部胀满。发现尸体明显脱水，哺乳仔猪胃肠胀满，胃内充满酸臭的凝乳块；小肠壁变薄、胀气、半透明、轻度出血，小肠内可见凝乳块及泡沫样液体；空肠、回肠绒毛萎缩，肠系膜充血，肠系膜淋巴结肿大；胃底黏膜轻度充血、出血；病死猪肝、肾脏浑浊肿胀、脂肪变性，有轻微出血点。

3 实验室诊断

3.1 病毒检测

采取适量病变肺脏组织和淋巴结，研磨成悬浊液后利用酚氯仿法对送检组织总RNA进行抽提，利用本实验室已建立的RT-PCR诊断方法，进行PCR检测猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒及猪轮状病毒。将产物经1%琼脂糖凝胶电泳。

图1 病毒RT-PCR扩增结果

从图1条带大小分析检测结果为TGEV阳性，PEDV、猪轮状病毒阴性。

3.2 细菌鉴定

将病猪的心、肝、脾、肺、肾脏等组织病料无菌接种到普通琼脂平板、血清琼脂平板、兔血琼脂平板、麦康凯琼脂平板及伊红美蓝琼脂平板，置37℃培养。18～24h后，普通琼脂平板及血琼脂平板均长出均一的、表面隆起、圆滑、半透明菌落；在兔血琼脂平板上呈明显溶血；麦康凯平板上的菌落呈红色、有金属光泽；伊红美蓝琼脂平板上形成黑色、具金属光泽菌落。挑取单个菌落经革兰氏染色呈阴性，生化鉴定结果符合大肠杆菌特性，综合判定优势菌为大肠杆菌。

3.3 细菌致病试验及药敏实验

挑取典型大肠杆菌单个菌落于LB肉汤，37℃振荡培养10h，取培养产物0.2mL接种小鼠，24h后试验5只小鼠均死亡；另取培养产物经3倍稀释后吸0.2mL涂布于LB琼脂平板，待其干后，用无菌镊子将药敏纸片等距贴在培养基表面，倒置于37℃培养箱中培养18～24h，观察记录抑菌圈大小。结果见表1。

以上结果表明：该大肠杆菌对林可霉素、氧氟沙星高度敏感，对磺胺间甲氧苄啶、氟苯尼考、强力霉素、环丙沙星、痢特灵、头孢噻呋钠、复方新诺明等低敏或不敏感。

4 防治措施

根据流行病学调查、临床症状观察、病理剖检和实验室诊断得出结果后对该场采取以下病情控制措施：

1）加强对全场猪舍、环境的卫生及消毒工作，特别是产房及母猪的清洁卫生和护理，消毒药物可采用0.3%～0.5%过氧乙酸等。

2）对怀孕母猪产前3～4周注射猪传染性胃肠炎和流行性腹泻二联苗，对未发病仔猪预防接种0.5mL/头。

3）对仔猪按1mL0.5%樟脑磺胺酸、2mL5%碳酸氢钠和2mL维生素C及100mL5%葡萄糖生理盐水进行静脉输液，2次/d，连续3d，饮水中加入补液盐及黄芪多糖。

4）对患病母猪饲喂黄芪多糖等提高免疫力，促其自然康复；对脱水严重的病猪，静脉注射5%葡萄糖生理盐水和5%碳酸氢钠水溶液等。

5）选取在药敏试验结果中敏感性高的药物对感染猪口服或注射，如林可霉素、氧氟沙星药物，按说明书方法及剂量给药。

通过以上措施，患病仔猪病情减轻、精神好转，产房仔猪患病率明显降低，第3天无仔猪死亡。新生仔猪未再发病，猪场恢复生产。

5 小结与讨论

猪传染性胃肠炎是由冠状病毒科冠状病毒属的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的一种急性、高度接触性传染的病毒性传染病，以呕吐、严重腹泻、脱水、2周龄内仔猪高死亡率为主要特征[1],且常继发细菌感染[2]。本病于1945年在美国由Doyle等[3]首次报道了本病的发生。之后，许多国家和地区也报道发生了本病。中国台湾地区1956年首次报道了本病的发生，此后全国大部分省份也相继有本病发生的报道。严重影响养猪业的发展[4]。

表1 分离大肠杆菌对12种常见药物的敏感试验mm

猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻均是由冠状病毒引起的以仔猪发生呕吐、腹泻和脱水为显著临床症状的两种传染病[5]，其流行病学、病理变化极其相似[6]，难于区分诊断。目前，国内对这两种病的鉴别诊断方法主要有病毒中和试验、免疫荧光法、免疫电镜法、ELISA法和RT-PCR法[7-8]。ELISA法和RTPCR法以其敏感性高、特异性强、生产成本低等优点赢得了广大生产者及科学工作者的青睐。在本次诊断中正是利用RT-PCR法对病样进行诊断，快速、准确、高效，为养殖场对病情的掌握，及早采取防治措施赢得先机，减少了经济损失。

目前针对猪传染性胃肠炎的治疗尚无特异性疗法[9]，且由于病毒感染后常引起免疫抑制病而继发感染。在生产中应加强饲养管理及合理预防控制，平时对猪舍、环境做好卫生及消毒工作，特别是产房及母猪的清洁卫生和护理；预防接种疫苗，对群体接种猪传染性胃肠炎和流行性腹泻二联苗进行预防，减少发病；加强猪群抗体动态监测，定期科学采集血清，进行群体抗体水平评估，指导和调整免疫程序；积极坚持自繁自养模式，严格执行全进全出饲养方式，减少仔猪感染机率；发病后，立即隔离病猪，全场消毒。恢复发病仔猪自身机体免疫力，防寒保温[10]，及时补充水分、电解质、调节酸中毒和补充营养；加强猪场耐药性监测，定期进行药物筛选，在药敏试验结果中选择高敏感性抗菌性药物，控制细菌性继发感染疾病。

在本次病例诊断过程中，积极采取上述防治措施，有效地解决了发病猪场疫情，达到了挽回经济损失的目的,也为四川地区集约化猪场在应对猪传染性胃肠炎时提供治疗方法及用药方面提供参考。

[1]陈健雄，杨玉坚.猪传染性胃肠炎的临床诊断和防制[J].养猪，2008(01):65-67.

[2]任玉鹏，王利娜，颜其贵，等.猪流行性腹泻的预防与控制[J].猪业科学，2010(12):36-39.

[3]斯特劳，阿莱尔，蒙加林，等.猪病学[M].北京，中国农业大学出版社，2000:316-319.

[4]辛海军.猪传染性胃肠炎[J].畜牧兽医科技信息，2010(06):98-98.

[5]张坤,何启盖.猪流行性腹泻病毒,猪传染性胃肠炎病毒和猪A群轮状病毒多重RT-PCR检测方法的建立及临床应用[J].畜牧兽医学报，2010，41(8):1001-1005.

[6]CHAEC,KIMO,CHOC,etal.PrevalenceofporcineepidemicdiarrhoeavirusandtransmissiblegastroenteritisvirusinKoreapigs[J].JVetRes,2000,147:606-608.

[7]王萃瑜.猪流行性腹泻病毒部分S基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立[D].长春：吉林农业大学，2008.

[8]韩国全，郭万柱，李云云，等.猪传染性胃肠炎病毒检测技术研究进展[J].猪业科学，2008(12):33-36.

[9]李中兴，毛雪红.猪病毒性腹泻的防控措施[J].广东畜牧兽医科技，2009,34(5):30-33.

[10]魏天锁，罗香彦，海兴正，等.仔猪传染性胃肠炎的综合防控[J].动物医学进展，2007,28:106-107.